《表1 α-酮酸衍生化产物紫外-可见吸收波长》

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《HPLC法检测几种α-酮酸化合物的柱前衍生化条件优化》

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丁酮酸、丙酮酸钠、酮戊二酸单钾盐并没有紫外吸收，因此需检测衍生化反应前后紫外吸收波长的变化。首先，单独取500μmol·L-1 NPDA 200μL装入石英比色皿中，在200～800 nm波长范围扫描，测得有2个最大的吸收波长，分别是λ1=267.0 nm，λ2=404.0 nm。然后将10 mmol·L-1的NPDA稀释至500μmol·L-1，分别与丁酮酸、丙酮酸钠、酮戊二酸单钾盐按照物质的量比1∶1在pH=3、温度45℃、加热时间20 min的条件下反应，分别取衍生化产物200μL置于石英比色皿中，在200～800 nm的范围内扫描，结果如表1所示。测得的结果都接近260.0 nm，且在260.0 nm处的峰易于辨别，因此将260.0 nm作为检测波长。