《表2 卵母细胞冷冻保存方案及活力评估举例》

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《生殖细胞及胚胎冻存技术发展及展望》

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由于卵母细胞，特别是在海洋无脊椎动物的卵母细胞对低温存在敏感性，因此常用的冻存方法是程序性降温，使用缓慢的降温速率或者两步降温法，最后将样品存于液氮保存。相关技术研发一般是针对冷冻保护剂的选择和比例优化。在海洋无脊椎生物中，最常用的冷冻保护剂是10%乙二醇。TERVIT，et al[37]使用10%乙二醇作为冷冻保护剂，用两步冷冻法进行冻存后使用28℃水浴复苏太平洋牡蛎Crassostrea gigas卵母细胞得到74.5%的受精率，其中30%发育成担轮幼虫；ADAMS，et al[[38]仅改变降温速率，将太平洋牡蛎的担轮幼虫发育率提高到50%。而ADAMS，et al[39]使用与TERVIT采用的相同冷冻方法和复苏方法，在冷冻保护剂中添加了0.4 mol·L-1的海藻糖后，复苏新西兰绿唇贻贝Perna canaliculus的担轮幼虫率仅有1%。YANG，et al[40]认为使用一步缓慢降温冷冻法（-1.5℃·min-1）配合2 mol·L-1二甲基亚砜作为冷冻保护剂最适宜鲍鱼Haliotis diversicolor卵母细胞的低温保存，并得到48.8%的卵母细胞存活率和24%的孵化率。目前研究报道的部分卵母细胞冷冻保存方案和活力评估数据见表2。