《表1 非洲猪瘟ddPCR和q PCR检测检出限比较》

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《非洲猪瘟病毒微滴式数字PCR检测方法的建立与应用》

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将重组质粒以10倍的梯度进行稀释，并配置PCR反应体系，得到终质量浓度分别为0.1～500 fg/反应的样品，而后进行dd PCR检测。所有dd PCR反应生成的微滴数目均大于10 000滴，表明所有反应微滴均正常生成，保证了后续定量分析的准确性。试验表明，dd PCR的检测范围是101～106拷贝数/反应，所有检出限均高于空白限，结果可靠，其中引物探针3的检测线最低，为2.73拷贝数/反应（表1）。从根据检测结果绘制的标准曲线中可发现，样品DNA浓度在101～106拷贝数/反应之间时，dd PCR检测结果呈良好的线性关系，3组引物探针的R2都大于0.990 0，适合定量检测的需要（图3）。