《表1 Omp31引物：布鲁氏菌RPA-LFD检测方法的建立》

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《布鲁氏菌RPA-LFD检测方法的建立》

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利用细菌基因组提取试剂盒分别提取布鲁氏菌S2疫苗株、维氏气单胞菌、大肠杆菌、甲型副伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、乙型溶血性链球菌基因组，根据GenBank中登录的布鲁氏菌Omp31基因（AY484527.1）保守序列设计引物（表1），以提取的布鲁氏菌S2疫苗株基因组为模板进行PCR扩增，将扩增片段回收纯化后克隆至p MD18-T载体，构建重组质粒标准品p MD18-T-Omp31，经PCR鉴定和重组质粒测序后按照公式：拷贝数（copies/μL）=6.02×1023×质粒浓度（ng/μL）×10-9/（质粒碱基数×660），计算质粒拷贝数。