《表2 引物编号及系列:苦荞麦不同部位干燥后DNA提取效果的比较及薄壳性状关联SSR引物筛选研究》

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《苦荞麦不同部位干燥后DNA提取效果的比较及薄壳性状关联SSR引物筛选研究》


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PCR反应的各种试剂均购自昆明宝赛科技有限公司,从已有的700对SSR引物中随机选出2对引物BM496、BM571,引物系列见表2,对不同部位提取的DNA进行扩增,PCR产物用8%聚丙烯酰胺凝胶电泳,银离子染色,甲醛显影拍照分析。PCR反应程序:94℃预变性5 min,94℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸1 min,共35个循环,最后72℃终延伸5 min。PCR反应体系:采用20μL体系,10×Taq Buffer(含20 mmol/L Mg2+)2μL,DNTP(10 mmol/L)0.4μL,Taq酶(1000 u)0.5μL,引物F0.6μL,引物R0.6μL,DNA模板2μL,加ddH2O至20μL。