《表1 dPCR仪比较:数字PCR技术及其在检测领域的应用》

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《数字PCR技术及其在检测领域的应用》


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根据参考文献[20,21]汇总修改。

目前,dPCR的广泛应用归因于样品分散问题这一关键制约因素的成功解决。纳米加工及微电子技术发展使得高通量分散样品并获得均匀反应单元成为可能。目前市场上使用的数字PCR仪根据样品分散方式可分为两大类:(1)基于微流控芯片数字PCR仪。此类平台又分为封闭式(美国Fluidigm公司BioMark以及美国Formulatrix公司Constellation系统)和开放式(美国ThermoFisher公司Quant Studio)两种平台。封闭式平台是在硅片或石英玻璃上光刻多个微管或微腔室,通过不同的阀门控制溶液的流动,实现样品制备、反应、分离和检测[3];开放式平台是以超高密度亲疏水微孔芯片作为反应载体,芯片表面被处理成疏水,而微孔内部为亲水,这种亲疏水结合的方式可使样品及反应体系轻易进入微孔而不会停留在表面,从而形成密集的独立微反应室并避免了各反应之间的交叉污染[17~19]。(2)基于油包水技术的微滴数字PCR平台(美国Bio-Rad公司QX100、QX200和RainDrop系列,中国锐讯生物公司DropX-2000、小海龟BioDigital以及法国Stilla Technologies公司Naica System)。该平台通过液滴发生器将乳化液滴分散成大小均一的液滴反应单元,样品分散过程中的破裂容易造成假阳性,而且分散通道的堵塞问题也是一个关注的重点。相对于基于芯片的数字PCR仪,微滴数字PCR仪价格更为低廉。各种仪器的详细信息见表1所示。