《表2 性激素通路基因引物信息》

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《小鼠CYP2J5基因组织差异表达及蛋白质结构与功能分析》

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采用Trizol法提取实验组与对照组细胞RNA，核酸/蛋白浓度测定仪检测其浓度。以总RNA为模板，Oligo（dT）为引物（表2），按照PrimeScript（Ta KaRa）反转录试剂盒，进行反转录反应，合成相应的c DNA。以c DNA为模板，选取小鼠β-actin作为内参基因。采用实时荧光定量PCR检测CYP2J5基因及脂代谢与性激素相关基因mRNA表达水平。扩增体系:SYBRⅡ（Ta KaRa）5μL，Primer F/R 0.8μL，c DNA 1μL，H2O2.4μL。反应程序:95℃预变性10 min；95℃变性15s；60℃退火1 min。溶解曲线收集信号的程序:95℃预变性15 s；60℃变性1 min，95℃退火15 s。