《表1 ELISA法检测多克隆抗体效价》

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《尼罗罗非鱼p38MAPK多克隆抗体的制备及鉴定》

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对制备的多克隆抗体按1∶250到1∶256 000进行倍比稀释，用间接ELISA法检测，结果（表1）显示，在抗体稀释256 000倍的情况下，OD450阳性/OD450阴性比值大于2，可见制备的抗体效价较高，达到了1∶256 000。重组蛋白Western blot的结果（图6A）显示，1∶2 000，1∶4 000，1∶8 000稀释的一抗在23 kD处均有条带，且附近杂带较少，特异性良好。综合考虑目的条带清晰度以及杂带情况来看，Western blot实验时应采用1∶4 000比例稀释一抗较好。采用1∶4 000比例稀释一抗对尼罗罗非鱼肌肉组织样品进行Western blot实验，结果如图6B所示，在38 kD处可见明显条带，且附近杂带较少，该抗体可用于后续罗非鱼免疫研究。