《表1 相应抗体及鬼笔环肽信息》

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《血小板源性生长因子受体α阳性细胞在先天性肾盂输尿管连接部梗阻发病中的表达及意义》


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对30例UPJO组和10例对照组的UPJ组织标本进行免疫荧光染色:(1)PDGFRα和C-kit采用免疫荧光双染,探讨PDGFRα阳性细胞与Cajal细胞的分布关系;(2)PDGFRα和鬼笔环肽采用免疫荧光双染,探讨PDGFRα阳性细胞与平滑肌细胞的分布关系,并对平滑肌细胞表型进行对比分析;(3)PDGFRα和PGP9.5免疫荧光双染,探讨PDGFRα阳性细胞与神经纤维的分布关系;(4)PDGFRα和SK3免疫荧光双染。标本石蜡包埋,10μm厚横切后,将切片置入65℃烤箱60 min。脱蜡后用10%牛血清白蛋白(Solarbio,中国北京)阻断30 min,避免非特异性吸收。随后切片在4℃环境下、1%牛血清白蛋白稀释磷酸盐缓冲液中予一抗孵育一夜。切片用磷酸盐缓冲液冲洗,与相应的二抗或鬼笔环肽在室温下孵育1 h(相应一抗、二抗种类、来源和浓度等信息见表1)。最后所有切片用4′,6二脒基2苯吲哚盐酸抗体(4′6diamidino2phenylindole,DAPI)染色10 min,用荧光封闭剂冲洗、安装、封片。