《表2 马蓝BcTSA引物信息》

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《马蓝色氨酸合成酶基因的克隆、序列及表达分析》

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根据试剂盒提取马蓝总RNA，将符合条件的RNA反转录成cDNA，并保存在-80℃。运用Primer Premier 5.0设计引物P1，上下游分别引入XbaⅠ、SalⅠ剪切位点及保护碱基（表2），送公司合成后进行目的基因的扩增，扩增条件：2×Taq PCR Master Mix 10μL，上下游引物各1μL，模板0.5μL，ddH2O 7.5μL，扩增产物用2%的琼脂糖凝胶电泳检测（图1）。将目的条带回收，双酶切后与pENTR/D-TOPO载体进行连接，涂板，挑单克隆菌液PCR验证，将符合条带大小的菌液送公司测序。