《表1 各水稻品种的转化频率》
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《利用共转化方法创制携带Pi9抗稻瘟病基因的无选择标记转基因水稻》
注:*转化频率:(选择培养基上长出转化细胞(HPT+GFP+)的共培养愈伤组织的数目)/(共培养愈伤总数)×100%;**再生频率:产生再生植株的转化愈伤组织占独立转化愈伤总数的百分比
以5个粳稻基因型(‘浙恢414’,‘浙粳22’,‘浙11B’,‘日本晴’和‘空育131’)和1个籼稻基因型(粤泰B)为转化受体,从种子成熟胚诱导水稻愈伤组织。目的基因载体p LJ42的农杆菌与标记基因载体p RB01的农杆菌按1∶4比例混合,与水稻愈伤组织共培养,然后在潮霉素选择培养基上进行选择培养。在灯式荧光检测器下,共培养愈伤组织的表面长出具有潮霉素抗性和绿色荧光的转化细胞团(图2)。统计产生转化细胞团(HPT+GFP+)的共培养愈伤组织的数目,计算该数目占共培养愈伤总数的百分比(即转化频率)(表1)。6个水稻品种不同批次转化实验的转化频率为5%~38.3%,从转化愈伤组织再生植株的频率为31.6%~82.0%(表1)。‘粤泰B’和‘空育131’的转化频率较低,这可能与水稻基因型、各批次实验条件的变化等相关。
图表编号 | XD00131429200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.01.28 |
作者 | 潘龙玉、李军、王歆、刘中来、赵建华、刘雄伦、戴良英、毛雪琴、瞿绍洪 |
绘制单位 | 浙江师范大学化学与生命科学学院、浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所、浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所、浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所、浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所、浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所、湖南农业大学作物种质创新与资源利用省重点实验室、湖南农业大学作物种质创新与资源利用省重点实验室、浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所、浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所 |
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