《表1 正交试验L9(34)的因素和水平》

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《猪源肠外致病性大肠埃希氏菌的生物膜形成能力及耐药性》

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为了探讨培养基、培养温度、培养时间和初始菌液浓度对分离菌株生物膜形成的影响，选取培养基种类（BHI、TSB和营养肉汤）、培养温度（34、37、40°C）、培养时间（24、36、48 h）和初始菌液浓度（OD600值0.2、0.3、0.5）4个因素，每个因素各取3个水平，按L9（34）迚行正交试验（表1），采用文献[8]报道的微孔板结晶紫染色法检测细菌生物膜。主要步骤为：将分离菌株接种不同培养基培养至不同OD600值，取菌液加至96孔细胞培养板，200μL/孔，按表1中设置温度与时间迚行培养，共做3个复孔，同时设置培养基作空白对照。培养结束后对生物膜依次迚行甲醇固定、0.5%结晶紫染色、33%冰醋酸溶解结晶紫、测定溶解液OD570值，通过分析各试验组与空白对照组的平均OD570，确定3株分离菌株形成生物膜的最佳条件。