《表1 胃癌circRNA作为microRNA“分子海绵”的机制总结》

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《环状RNA在胃癌中的研究进展》

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Liu等[44]创新了以人造小分子干扰方式调节circRNA表达水平的思路。大量研究证明，miR-21是胃癌恶性进展的参与者之一[45-47]。该团队利用分子生物学手段构建了含有5个miR-21吸附位点的人造circRNA(scRNA21）。具体方式如下：利用重叠PCR扩增miR-21互补结合位点，形成scRNA21的基本功能单位；扩增产物连接至含有T7启动子的环状质粒；单酶切质粒，变为线性结构；利用T7 RNA聚合酶大量扩增功能单位；磷酸酶去除5'端磷酸化；T4多核苷酸激酶使RNA分子具备稳定连接能力；T4连接酶使线性RNA成环。scRNA21通过抑制miR-21降低细胞增殖，诱导细胞凋亡，Western印迹显示其下游抑癌蛋白DAXX表达上调，以上结果证明基于circRNA结构的miR-21抑制剂构建成功。人造circRNA可以灵活调节miRNA抑制效率，精准性高，兼顾安全性和有效性，与RNA干扰一同作为胃癌相关miRNA的干预方式，也是未来胃癌治疗的发展方向之一。