《表1 引物序列:高分子量多环芳烃降解菌筛选及在土壤电动-生物修复中应用》
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《高分子量多环芳烃降解菌筛选及在土壤电动-生物修复中应用》
芘降解菌的初筛采用革兰氏阴性细菌(Gramnegative,GN)和革兰氏阳性细菌(Gram-positive,GP)PAH-RHDα引物检测分离细菌中PAHs双加氧酶基因(PAH-RHDα)。所用的引物分别为PAH-RHDαGN F/PAH-RHDαGN R和PAH-RHDαGP F/PAH-RHDαGP R,各引物序列如表1所示(Cébron et al.,2008),PCR扩增条件参照李志杰(2017)和蒙小俊等(2017)。反应体系50μL:10×Buffer(含2.0 mmol·L-1MgCl2)5μL,dNTP(10mmol·L-1)1μL,引物(10μmol·L-1)各1μL,Taq酶(5 U·μL-1)0.25μL,模板DNA 2μL,ddH2O补至50μL。PCR扩增程序:95℃5 min预变性;95℃变性30 s,50℃退火30 s,72℃延伸30 s,35个循环;延伸5 min,4℃保存。取PCR产物各2μL,1%琼脂糖,1×TAE缓冲液,120 V稳压电泳30 min,利用凝胶成像系统检测PCR的扩增效果。
图表编号 | XD00123622800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.01.01 |
作者 | 张金宝、李凤梅、郭书海、鲁文杰、孙子程、赵明阳 |
绘制单位 | 中国科学院沈阳应用生态研究所、中国科学院大学、中国科学院沈阳应用生态研究所、污染土壤生物-物化协同修复技术国家地方联合工程实验室、中国科学院沈阳应用生态研究所、污染土壤生物-物化协同修复技术国家地方联合工程实验室、中国科学院沈阳应用生态研究所、中国科学院大学、中国科学院沈阳应用生态研究所、中国科学院大学、中国科学院沈阳应用生态研究所、中国科学院大学 |
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