《表1 方阵滴定法确定工作浓度》

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《保健食品中微量酚酞ELISA的快速检测方法》


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采用方阵滴定法确定包被抗原浓度、抗体稀释倍数。包被原氨基化酚酞质量浓度为2,3,4,5和6μg/m L。抗体血清由1︰50倍比稀释至1︰1 600。采用间接非竞争ELISA测定OD450 nm值。通过间接非竞争ELISA确定最佳包被浓度及抗体的稀释倍数,检测结果见表1。为确保检测结果的准确性及方便分析,一般选取OD450 nm值1左右。ic-ELISA检测时血清的量为50μL,因此选OD450 nm值2.0左右。由表1可知,氨基酚酞质量浓度4μg/mL、抗体血清稀释倍数1︰100时,OD450 nm=2.017,即包被抗原的最佳质量浓度4μg/mL,抗体的最佳稀释倍数1︰100。