《表2 14个三七及其种植土壤样品的Real-time PCR检测结果》

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《三七根腐病菌尖孢镰刀菌的Real-time PCR检测方法》

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从三七根腐病、黑斑病病株及种植土壤中提取总DNA，然后进行实时荧光定量PCR以检测尖孢镰刀菌的含量。各样品的扩增曲线见图5，将各样品3次重复的Ct均值带入标准曲线计算得到尖孢镰刀菌含量（表2）。几个三七根腐病样品（7～10号）有明显扩增，Ct值平均值分别为29.53，34.20，33.77，33.22，尖孢镰刀菌的含量均大于7 pg/g样品，含量高的多达177 pg/g样品，可见尖孢镰刀菌在三七根腐病病株的根部样品中大量存在。其余样品均无扩增，说明在健康的三七根部及其种植土壤、三七黑斑病病叶及健康叶片和根腐病土壤样品中均没有检测到尖孢镰刀菌。上述试验结果显示，本研究设计的引物以及建立的实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏、可靠，能准确诊断三七根腐病样品中是否含有尖孢镰刀菌以及测定尖孢镰刀菌的含量。