《表1 瘤胃内部分功能细菌的引物》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《利用体外发酵法研究蜜蜂肽对瘤胃发酵参数及甲烷气体排放量的影响》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

将上述步骤提取的微生物DNA对瘤胃微生物进行绝对定量，使用实时定量PCR检测系统（Bio-Rad Laboratories Inc．，加拿大）。细菌的质粒DNA与试验羊的瘤胃微生物DNA在同一板进行扩增，反应体系为20μL，包括10μL EasyTaq DNA polymerase，7.8μL ddH2O，上、下游引物各0.6μL，微生物DNA样品1μL。各细菌的扩增引物如表1所示。参考王尧悦[16]的方法计算各样品中每种细菌的拷贝数。整个反应条件为：94℃预变性3 min、变性15 s，然后60℃退火30 s，72℃延伸20 s，共计40个循环。实时定量PCR反应结束后，自动生成熔解曲线。PCR产物均呈现单一的熔解峰。每个样品3个重复，所用引物的扩增效率在87%～98%。