《表3 纯化后病毒检测：5型腺病毒一步层析纯化方案研究》

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《5型腺病毒一步层析纯化方案研究》

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本次研究首先选择了GE公司新开发的离子交换和分子筛结合的复合型填料Capto core700，此种复合填料的核心成分为带有辛胺配基的多孔微球，宿主蛋白可以进入微球，并被辛胺配基结合，而病毒颗粒大小远超该孔的排阻分子量故而流穿出来，由于该种纯化方式是通过收集流穿来获取病毒，所以病毒的损失非常小，回收率很高，但由于染色体分子成纤维缠绕状，经常也难以进入微孔，故此填料在去除DNA方面的表现还不够好。Fractogel DEAE是一种新型阴离子交换填料，该填料由于添加了Fractogel触手结构，比等量的传统的离子交换调料多出了空间抓取病毒颗粒的机会，故而具有载量高、流速大的特点，通过与超滤步骤的结合，达到了非常好的除杂效果，同时由于只经过了一步层析，所以腺病毒的回收率较原本的两步法有了非常大的提高。本研究提出了新型超滤加Fractogel触手填料层析纯化腺病毒的工艺，去除了分子筛步骤，实验证明可产生高滴度无杂质的效果，有望广泛用于临床级腺病毒的规模化生产。