《表1 H9N2 AIV鉴别检测及测序引物》

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《2016年～2018年山东地区25株H9N2亚型禽流感病毒分子分析》

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将疑似H9N2 AIV的病料匀浆处理后离心取上清，接种9日龄～11日龄SPF鸡胚，37℃孵化72 h，无菌收集对鸡红细胞有血凝性的尿囊液，提取病毒RNA，参考GenBank中已登录的H9N2 AIV序列，设计鉴定引物（表1），由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。通过鉴别诊断引物鉴定H9N2 AIV，鉴定正确的H9N2 AIV通过有限稀释法纯化3代，纯化的病毒通过SPF鸡胚扩增后，收集尿囊液分装作为种毒，-80℃保存。