《表2 牛黄清胃丸对照制剂指纹图谱特征峰归属》

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《牛黄清胃丸对照制剂的建立》

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采用UPLC法[15]建立牛黄清胃丸对照制剂的指纹图谱。取重量差异项下的本品适量，剪碎，取约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，称量，加热回流提取4 h，放至室温，用甲醇补足减失的量，摇匀，用微孔滤膜（0.22μm）滤过，取续滤液作为供试品溶液；取绿原酸、木犀草苷、柚皮苷、新橙皮苷、汉黄芩苷、黄芩素、大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、栀子苷、京尼平苷酸、连翘酯苷A、3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、橙皮苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、甘草酸铵、大黄酚、松脂醇二葡萄糖苷、芦丁、京尼平龙胆双糖苷的对照品适量，分别加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，即得各对照品溶液；另取人工牛黄、大黄、菊花、麦冬、薄荷、栀子、玄参、番泻叶、黄芩、甘草、桔梗、黄柏、连翘、牵牛子、枳实的对照药材，按相应原料在牛黄清胃丸处方和比例，分别精密称定1 g丸剂对应的量，按供试品溶液制备方法制得各对照药材溶液。色谱条件：采用Acquity UPLC?BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.8μm），柱温40℃，以乙腈（含0.5%甲酸）（A)-0.5%甲酸（B）为流动相，梯度洗脱（0～10 min，5%A→15%A；10～20 min，15%A；20～25min，15%A→20%A；25～30 min，20%A；30～35 min，20%A→25%A；35～50 min，25%A→80%A），流速0.2 mL·min-1，检测波长254 nm，进样量2μL。分别精密吸取对照品溶液、对照药材溶液、供试品溶液各2μL，注入超高效液相色谱仪，测得牛黄清胃丸对照制剂的指纹图谱见图6。选取43个特征峰，比较供试品溶液色谱和对照品溶液、对照药材溶液各色谱峰保留时间及PDA光谱，确认其归属，见表2。