《表1 不同病毒提取方法的比较》
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《小浆果中食源性甲型肝炎病毒和诺如病毒流行状况及检测方法的研究进展》
病毒洗脱-浓缩法通常较为复杂,尤其是针对容易释放大量酸性物质的小浆果时,需对洗脱液的pH值进行反复调节,同时进行多次孵育来释放病毒,完成病毒提取所需的理论时间大约为150 min。目前,直接向小浆果样品表面添加裂解液的病毒提取方法得到了一定应用(表1),具体步骤为:1)样品中添加裂解液,室温孵育5 min;2)室温条件下15 000×g离心5 min,提取病毒RNA。该法操作步骤简单,将病毒提取时间缩短了15倍,具有很好的病毒提取效率。Perrin等[51]采用该法对树莓样品进行检测,病毒回收率为46.2%,显著高于病毒洗脱-浓缩法(20.3%)。Summa等[45]对直接提取病毒法进行了改良,即收集1 mL的解冻树莓汁液后加入250μL PEG/NaCl溶液(含50 g、100 mL PEG 8000、1.5 mol/L NaCl)进行沉淀,该法对9份自然污染的冷冻树莓(100拷贝数)进行检测时,NoV GII.4的阳性检出率可达44.4%,提取效率(32%)高于病毒洗脱-浓缩法(24%)。受抑制物的影响,直接提取病毒法仍无法应用于其他类型小浆果的检测,该法在草莓中的病毒提取率仅为0.52%[41]。
图表编号 | XD00106050300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.10.15 |
作者 | 冯华炜、艾海新、杨天舟、齐梦园、谭燕妮、麻丽丹、刘宏生 |
绘制单位 | 辽宁大学生命科学院、辽宁大学生命科学院、辽宁省生物大分子模拟计算与信息处理工程研究中心、辽宁大学生命科学院、辽宁大学生命科学院、辽宁大学生命科学院、丹东出入境检验检疫局、辽宁大学生命科学院、辽宁省生物大分子模拟计算与信息处理工程研究中心 |
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