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目 录1

第一章糖类1

一、还原糖的测定1

(一)斐林试剂热滴定法1

(二)斐林试剂比色法3

(三)蒽酮比色法4

(四)纳尔逊-索模吉试剂比色法4

(五)金氏(King)定糖法5

(六)哈丁试剂滴定法6

(七)3,5-二硝基水杨酸目测法7

(八)3,5-二硝基水杨酸比色法8

二、含醛基糖的测定9

(一)次亚碘酸滴定法9

(二)邻甲苯胺比色法11

三、葡萄糖的测定12

(一)葡萄糖氧化酶测定法12

(二)在硅胶G薄层上的分离鉴定及定量测定13

四、果糖的测定——钼酸铵比色法14

五、蔗糖的测定——Roe比色法15

六、五碳糖的测定——苔黑酚比色法16

七、氨基葡萄糖的测定16

(一)生物材料的预处理的一般方法17

八、生物材料中糖类物质的分析17

(二)苹果中糖类的分离鉴定及定量测定19

(三)小麦籽粒中可溶性糖的鉴定及定量测定21

参考资料22

第二章脂质类23

第一节脂肪化学性质的测定23

一、碘值23

二、皂化值25

三、不皂化值27

四、酸值29

第二节粗脂肪的定量测定30

第三节血清中脂质类的测定31

一、血清β-脂蛋白31

二、血清胆固醇32

(一)邻苯二甲醛法32

(二)改良Abell氏法34

三、血清甘油三酯35

(一)直接法35

(二)快速法36

四、血清脂蛋白电泳38

(一)醋酸纤维薄膜脂蛋白电泳38

(二)聚丙烯酰胺脂蛋白电泳40

参考资料42

第三章蛋白质类43

第一节氨基酸和蛋白质的定性测定43

一、氨基酸的定性测定43

(一)氨基酸的一般显色反应43

(二)个别氨基酸的显色反应46

二、蛋白质的定性测定49

(一)蛋白质的一般显色反应49

(二)复合蛋白质的显色反应51

(一)茚三酮法52

一、氨基酸的一般定量测定52

第二节氨基酸的定量测定52

(二)三硝基苯磺酸法54

(三)铜复合物紫外吸收法57

(四)邻苯二甲醛法58

(五)甲醛滴定法59

(六)非水溶液滴定法60

(七)量气法62

(八)酰胺氮测定法65

二、个别氨基酸的定量测定68

(一)赖氨酸的测定68

(二)色氨酸的测定70

(三)亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的联合测定74

(四)苯丙氨酸的测定77

(五)酪氨酸的测定79

(六)脯氨酸的测定80

(七)羟脯氨酸的测定81

(八)胱氨酸的测定83

(九)谷氨酸的测定84

(十)谷氨酰胺的测定86

(十一)巯基的测定88

(一)总氮量的测定法89

一、克氏定氮法89

第三节蛋白质的定量测定89

(二)微量克氏定氮-茚三酮法92

二、福林-酚试剂法93

(一)Lowry基本法93

(二)在有干扰物质存在下的改良测定法94

(三)简易测定法95

三、双缩脲法95

(一)双缩脲常量法96

(二)双缩脲半微量法96

四、紫外吸收法97

(一)280毫微米的光吸收法97

(二)280毫微米和260毫微米的吸收差法98

(三)215毫微米和225毫微米的吸收差法99

(四)肽键测定法99

五、考马斯亮蓝染色测定法99

第四节蛋白质的末端测定101

一、N-末端测定——二甲氨基萘磺酰氯法101

二、C-末端测定——肼解法105

参考资料108

第四章核酸类110

第一节核酸的分离提取110

(一)小牛胸腺DNA的提取111

一、DNA的提取111

(二)微生物DNA的提取112

二、RNA的提取113

(一)肝脏RNA的提取113

(二)酵母RNA的提取114

第二节核酸及其组分的定量测定115

一、定磷法115

(一)酸解脱磷法115

(二)过碘酸氧化脱磷法117

二、定糖法118

(一)RNA的定量测定118

(二)DNA的定量测定120

三、紫外吸收法122

(一)标准值测定法123

(二)比消光系数法124

(三)克分子消光系数法125

(四)克原子磷消光系数(8(P))法125

四、荧光法126

(一)微量测定寡核糖核苷酸3′-末端126

(二)微量测定双链核酸127

(一)化学方法128

(二)物理方法128

五、DNA中GC克分子百分率[(G+C)%]的测定128

第三节核酸的水解130

一、化学水解法130

(一)DNA的水解130

(二)RNA的水解130

二、酶促水解法131

第四节核酸水解产物的分离鉴定131

一、层析分离鉴定131

(一)纸层析法131

(二)薄层层析法135

(三)离子交换树脂柱层析法139

(一)纸电泳分离核苷酸144

二、电泳分离鉴定144

(二)琼脂糖凝胶电泳分离核苷酸145

(三)琼脂糖凝胶圆盘电泳分离ECoRI酶解λDNA片段146

第五节组织中核酸含量的测定147

一、组织材料的预处理147

(一)Schneider测定法(酸处理法)148

(二)Schmidt和Thannhauser法(碱处理法)148

二、大白鼠肝组织核酸含量的测定148

附录常用核酸类物质的常数表151

参考资料153

一、维生素A比色测定法154

第五章维生素类154

二、维生素B1(硫胺素)荧光测定法157

三、维生素B2(核黄素)荧光测定法159

四、维生素B6(盐酸吡哆醇)比色测定法161

五、维生素C(抗坏血酸)定量测定法162

(一)2,6二氯酚靛酚滴定法162

(二)2,4二硝基苯肼法163

(三)碘滴定法165

六、维生素D比色测定法166

参考资料168

一、甾类激素——直接紫外分光光度法169

第六章激素类169

二、甾酮——异菸肼反应法172

三、甾酮——2,4-二硝基苯肼反应法174

四、次甲基酮-碱性二硝基苯反应法176

五、17,21-二羟基皮(甾)醇——盐酸苯肼反应法179

六、α-醇酮基——高碘酸氧化反应法181

七、α-醇酮基——四氮唑盐反应法183

八、甾类酯类——碱性羟胺反应法184

九、雌激素——铁-酚试剂反应法185

十、尿中雌(甾)酮、雌(甾)二醇、雌(甾)三醇——Brown测定法187

十一、尿中孕(甾)二醇——Kiopper测定法190

参考资料192

第七章辅酶类193

一、辅酶Ⅰ——醇脱氢酶法193

二、还原型辅酶Ⅰ——乳酸脱氢酶法195

三、辅酶Ⅱ——葡糖-6-磷酸脱氢酶法196

四、还原型辅酶Ⅱ——谷胱甘肽还原酶法198

五、黄素腺嘌呤二核苷酸——光吸收法199

六、硫胺素焦磷酸——纸层析法和光吸收法200

七、磷酸吡哆醇——纸层析法和光吸收法200

八、磷酸吡哆胺——纸层析法和光吸收法201

九、辅酶A——乙酰化酶-磺胺法202

参考资料204

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