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第一部份：基於光学显微镜术的方法1

光学方法1

显微镜1

绪论1

成像的几何光学3

照明4

成像的波动光学5

接物镜13

盖玻片的影响13

盖玻片厚度之测量13

浸液式接物镜15

接物镜的种类15

接物镜上面的标示18

接目镜18

聚光器22

参考文献23

显微照相术24

器材24

装有毛玻璃屏幕的显微照相机24

装置聚焦接目镜的显微照相机25

照相显微镜25

使用35mm照相机的显微照相术25

光学影像对显微照片之影响26

与正弦条件之偏差26

视域弯曲27

色像差27

滤光镜在显微照相术中的使用27

曝光与对比31

照相乳剂及其显影34

彩色显微照相术36

参考文献37

相位对比显微镜术38

原理38

振幅物体与相位物体38

相位对比39

相位对比显微镜40

相位对比影像42

定量的应用47

参考文献51

暗场显微镜术52

干涉显微镜术53

原理54

仪器55

定量的应用60

折射系数的决定60

厚度的决定60

固体浓度的决定61

乾燥质量的决定62

有关的仪器65

诺玛斯基氏干涉显微镜65

多束光干涉显微镜66

施利兰氏显微镜术66

参考文献67

偏极光显微镜术68

原理68

偏极光显微镜术的应用77

超微构造的研究77

组织化学上的应用80

参考文献82

萤光显微镜术83

原理83

技术上的必要条件83

仪器85

萤光显微镜85

相位对比萤光显微镜85

应用87

自体萤光87

萤光染料的使用88

用萤光机体定位抗原88

参考文献90

反射显微镜术90

参考文献92

显微技术未固定材料的处理法92

等渗溶液93

细胞与组织93

细胞核94

染色体94

分离的方法94

用酵素分离组织96

细胞核的分离98

染色体的分离100

供未固定材料使用的微皿101

固定103

原理103

化学固定105

穿透速率105

凝固和组织体积的改变105

固定剂106

锇酸106

甲醛108

混合固定剂110

参考文献110

切片术111

切片机和刀111

包埋111

石蜡包埋113

聚丙烯酸乙二醇酯包埋116

切片117

整修与固定凝块117

石蜡切片117

丙烯酸树脂切片119

聚丙烯酸乙二醇酯切片120

薄丙烯酸树脂切片的技术120

未除包埋剂的相位对比显微镜术121

除去丙烯酸树脂後的相位对比显微镜术122

未除去包埋剂的染色122

包埋剂溶解後的染色122

切片厚度的决定123

参考文献124

染色125

生物学的染料125

染料与组织的反应125

酸性和碱性染料之染色126

异染现象130

参考文献130

一般染色法131

迪拉佛氏苏木紫131

梅尔氏苏木明矾132

Heidenhain氏铁苏木紫132

Heiden's'Azan'-method133

硼砂—胭脂红133

参考文献134

细胞化学染色135

希佛氏试剂136

碳水化合物的定位139

过碘酸-希佛氏反应139

铬酸-希佛氏试验141

贝斯特氏肝糖染色141

核酸141

DNA的福尔金氏反应141

DNA的银-醛染色法144

DNA的萤光染料定位法145

核酸的酵素水解和酸性水解145

核酸的天青乙染色147

Pelling氏甲苯胺蓝147

甲基绿-派洛宁以及其他碱性染料配对147

DNA与RNA的福尔金氏甲烯蓝鉴别染色法148

Turchini氏反应的DNA和RNA染色149

培花青铬矾染色149

同一标本中的DNA与多醣的确定150

DNA，多醣和蛋白质的联合试验151

蛋白质152

汞／溴酚蓝152

萘酚黄152

低PH下的坚牢绿染色153

组蛋白和鱼精蛋白153

Albert氏和Geschwind氏组蛋白试验155

离氨酸的阻断156

苦味酸／曙红156

苦味酸／溴酚蓝157

RNA与细胞核组蛋白的染色157

Biebrich scarlet的碱性核蛋白染色157

阿金氨基酸的Sakaguchi氏反应158

酪氨酸的Millon氏反应159

蛋白质中的硫氢根之染色159

脂质160

苏丹黑乙的染色161

Nile blue Sulphate的染色161

Baker氏酸性苏木红试验162

无机成分163

酵素的定位163

琥珀酸去氢酵素的定位164

碱性磷酸塩酵素164

参考文献166

细胞构造的染色167

细胞的边缘167

细胞质167

粒线体168

烟鲁绿乙的活体染色168

固定组织中的粒线体染色168

高尔基系统171

用锇酸标示高尔基体171

用镀银法标示高尔基体171

中心体172

铁苏木紫172

甲烯蓝／藏红／橙G172

结晶紫173

核仁173

细胞核与染色体174

参考文献179

自动放射摄影术180

原理180

前质的「加标签」、应用和专一性181

自动放射摄影解像力186

组织标本的技术187

固定187

为自动放射摄影术准备玻片188

压扁标本与切片188

上乳剂之前的染色188

乳剂的应用188

剥膜法188

液态乳剂189

曝光时间190

照相处理190

自动放射影像的显微镜术191

定量估计192

轨迹计算法192

颗粒计算法192

使用两种乳剂的自动放射摄影术193

水溶性物质的自动放射摄影术194

人工构形194

背景195

化学人工构形195

潜在影像消退195

参考文献196

定量的方法197

显微测量技术197

长度的测量197

面积的测量198

体积的测量198

以线与点样品法测量相对体积199

角的测量199

悬浮液中的颗粒之计算199

切片中的颗粒计算200

显微分光光度测量201

原理201

应用204

仪器应用207

一些仪器的说明212

仪器的误差216

放大的不稳定216

光管反应与面积之间缺之线性关系217

仪器中的散光217

聚光器孔值的影响218

泛光218

由於带宽的误差219

来自标本的误差220

散光221

决定於波长的误差221

分布性误差222

比例性误差226

仪器性能的试验228

参考文献230

显微外科方法231

显微操作231

参考文献233

微光束照射233

参考文献236

第二部份：电子显微镜术237

原理237

电子透镜237

电子显微镜239

电子透镜的成像244

球面像差244

绕射245

解像力245

域深246

色像差247

轴性像散248

影像对比251

标本技术252

标本支持252

铂质标本孔的清洁253

支持膜与保护膜254

Formvar膜254

火棉厚胶膜255

碳膜256

保护膜257

有孔的支持膜257

标本技术的研究259

悬浮液259

表面散布259

表面铸膜259

冷冻浸蚀法260

超薄切片260

电子显微镜术的固定法260

缓冲四氧化锇之固定260

Dalton氏锇酸-重铬酸塩之固定262

过锰酸钾263

缓冲甲醛之固定263

Glutaraldehyde之固定法264

丙烯醛之固定法265

冷冻乾燥与冷冻取代法265

包埋266

一般技术266

丙烯酸树脂包埋法268

Araldite（聚环氧树脂）的包埋271

Maraglas（聚环氧树脂）的包埋272

Epon 812（聚环氧树脂）之包埋273

Vestopal包埋274

水可互溶性包埋剂275

混合包埋法276

超薄切片术277

玻璃刀277

断裂玻璃刀用的玻璃条277

断裂玻璃刀279

刀锋281

槽282

钻石刀283

超薄切片机283

超薄切片285

薄切片的初步光学显微研究288

金萨氏染色法289

甲苯胺蓝289

苏木紫289

过碘酸／希佛氏试验作肝糖和基底膜之染色290

亚硫化钴的沈淀染色法290

电子染色290

磷钨酸291

醋酸双氧铀291

碱性铅塩293

醋酸双氧铀与铅塩之双重染色295

钒塩的电子染色295

过锰酸钾296

铋的电子染色296

铟的电子染色297

负相染色298

电子显微的组织化学299

核酸300

银-醛反应之DNA定位301

肝糖302

黏多醣303

电子显微自动放射摄影术304

电子显微照相307

聚焦307

曝光308

照相底板和负片309

显影309

放大309

定量的方法310

放大倍数的决定310

宽度和间隔的测量311

高度的测量312

相对面积和体积的决定312

点样品法312

线样品法313

质量和密度的测量317

参考文献317

附录319

柯达D-72-般感光纸显影剂319

玻璃器皿的清洁液319

缓冲溶液319

有用的手册323

参考书目325

索引336