《医用分子细胞生物学》求取 ⇩

1绪论1

1.1 分子细胞生物学的定义和研究范围1

1.2 分子细胞生物学发展简史1

1.2.1 细胞学的创立1

1.2.2 细胞生物学的诞生2

1.2.3 分子细胞生物学的发展2

1.3 分子细胞生物学与医学的关系2

1.3.1 病因与发病机理的研究3

1.3.2 疾病诊断方面的应用3

1.3.3 治疗学的进展3

2细胞的分子基础4

2.1 核酸4

2.1.1 DNA4

2.1.1.1 DNA的一级结构4

2.1.1.2 NDA的二级结构9

2.1.1.3 DNA的三级结构25

2.1.1.4 DNA-蛋白质超分子复合体26

2.1.2 RNA28

2.1.2.1 RNA的分子组成与结构特点28

2.1.2.2 mRNA29

2.1.2.3 tRNA30

2.1.2.4 rRNA33

2.1.2.5 ribozyme36

2.1.3 反义分子38

2.1.3.1 反义RNA39

2.1.3.2 反义基因40

2.1.3.3 反义肽40

2.1.3.4 反义分子体系40

2.1.4.1 DNA分子的大小与脆性41

2.1.4 核酸的理化性质41

2.1.3.5 反义分子的应用41

2.1.4.2 DNA分子的呼吸运动42

2.1.4.3 核酸对紫外光的吸收与定量42

2.1.4.4 核酸的变性43

2.1.4.5 核酸的复性与杂交43

2.2 蛋白质45

2.2.1 蛋白质的结构45

2.2.1.1 蛋白质的构件分子45

2.2.1.2 蛋白质的分子结构45

2.2.1.3 蛋白质的构象运动49

2.3 蛋白质与核酸的相互识别51

2.3.1 调节蛋白的DNA结合结构域52

2.3.1.1 螺旋-转折-螺旋52

2.3.1.2 亮氨酸拉链52

2.3.1.4 同源结构域54

2.3.1.3 含锌结构域54

2.3.1.5 碱性α-螺旋55

2.3.2 蛋白质与DNA的识别55

2.3.2.1 蛋白质与dsDNA的一般识别55

2.3.2.2 蛋白质与dsDNA的特异性识别57

2.3.2.3 空间编码——“识别词典”60

3分子细胞生物学中常用的材料和方法62

3.1 细胞生物学方面62

3.1.1 病毒62

3.1.1.1 病毒的结构与化学组成62

3.1.1.2 病毒的生活周期63

3.1.1.3 病毒感染的噬菌斑测定64

3.1.1.4 病毒的分类67

3.1.1.5 病毒在分子细胞生物学中的应用69

3.1.2.1 大肠杆菌是分子生物学家一种特别喜爱的生物70

3.1.2 细菌70

3.1.2.2 基因可在细胞之间转移71

3.1.3 真核细胞72

3.1.3.1 真核细胞的培养条件72

3.1.3.2 原代培养和转化培养73

3.1.3.3 细胞融合是研究体细胞遗传的一种重要技术75

3.1.3.4 嘌呤和嘧啶合成的补救途径突变体是良好的选择标志75

3.1.3.5 杂交瘤是能产生单克隆抗体的融合细胞76

3.1.3.6 真核细胞的转化78

3.1.3.7 外来DNA也可以导入到动物生殖细胞中78

3.2 分子生物学方面78

3.2.1 放射性核素79

3.2.1.1 放射自显影79

3.2.1.2 放射性核素标记化合物82

3.2.1.4 液体闪烁计数83

3.2.1.3 放射性测量样品的制备83

3.2.1.5 淬灭及淬灭校正84

3.2.2 离心85

3.2.2.1 速度区带离心85

3.2.2.2 平衡密度梯度离心85

3.2.3 电泳88

3.2.3.1 蛋白质和核酸电泳分析原理88

3.2.3.2 一维和二维凝胶电泳89

3.2.4 层析91

3.2.4.1 纸层析91

3.2.4.2 柱层析91

3.2.5 研究核酸的工具酶和几种常用技术方法93

3.2.5.1 限制性核酸内切酶93

3.2.5.2 S1核酸酶消化带的分析96

3.2.5.4 NorthernBlot97

3.2.5.3 SouthernBlot97

3.2.5.5 DNA指纹分析法98

3.2.5.6 DNA的测序98

3.2.5.7 PCR（聚合酶链反应）101

3.2.5.8 重组DNA102

3.2.5.9 DNA可控和定点突变107

3.2.5.10 特定序列多肽和核苷酸的合成107

4细胞膜与受体112

4.1 细胞膜的结构和特性112

4.1.1 细胞膜的化学组成112

4.1.1.1 脂类115

4.1.1.2 蛋白质115

4.1.1.3 糖类115

4.1.2.3 液态镶嵌模型116

4.1.2.2 单位膜模型116

4.1.2.1 片层结构模型116

4.1.2 细胞膜的分子结构116

4.1.2.4 晶格镶嵌模型118

4.1.2.5 板块镶嵌模型118

4.1.3 细胞膜的特性118

4.1.3.1 膜的不对称性118

4.1.3.2 膜的流动性119

4.2.1 物质运输122

4.2 细胞膜的功能122

4.2.1.1 被动运输123

4.2.1.2 主动运输124

4.2.1.3 膜泡运输126

4.2.2 细胞识别130

4.2.2.1 细胞识别的分子基础130

4.2.2.2 细胞识别反应类型130

4.2.3 信息传递130

4.3.1.1 受体的命名及受体学说的发展131

4.3.1 受体的一般概念131

4.3 受体131

4.3.1.2 受体的定义133

4.3.1.3 受体的进化133

4.3.1.4 受体鉴定的标准133

4.3.2 受体的分类及特性135

4.3.2.1 受体的分类135

4.3.2.2 受体的化学性质136

4.3.2.3 受体的结构136

4.3.3 受体的作用机理142

4.3.3.1 受体的作用142

4.3.3.2 受体与配体的结合方式142

4.3.3.3 受体与配体的结合过程143

4.3.3.4 膜受体的作用机理143

4.3.3.5 细胞内受体的作用机理157

4.3.4 受体调节161

4.3.4.1 受体的生理调节162

4.3.4.2 细胞膜受体的再循环162

4.3.4.3 受体调节的分类162

4.3.4.4 受体调节的机制163

4.3.4.5 受体调节的复杂性165

4.3.5 受体的异常165

4.3.5.1 遗传性受体病167

4.3.5.2 自身免疫性受体病168

4.3.5.3 继发性受体病170

5细胞核与染色体171

5.1 细胞核和染色体的结构171

5.1.1 核膜171

5.1.2 染色质和染色体的分子结构171

5.1.3 核仁171

5.1.4 核基质172

5.6 核膜的功能173

5.1.6.1 屏障作用173

5.1.6.2 物质交换作用173

5.1.5 核纤层173

5.1.6.3 支架作用174

5.1.6.4 基因表达调控的阀门作用174

5.2 DNA的复制与修复174

5.1.2 DNA的复制174

5.2.1.1 DNA的半保留复制174

5.2.1.2 DNA的不连续复制175

5.2.2 DNA复制步骤175

5.2.2.1 预引发175

5.2.3 DNA的修复176

5.2.3.2 切除修复176

5.2.3.1 光复活修复176

5.2.2.4 链的终止176

5.2.2.3 链的延伸176

5.2.2.2 引发176

5.2.3.3 重组修复177

5.2.3.4 诱导修复和应急反应177

5.3 RNA的生物合成177

5.3.1 参与转录的酶177

5.3.2 转录过程178

5.3.2.1 转录的起始178

5.3.2.2 转录的延长178

5.3.2.3 转录的终止179

5.3.3 RNA转录后的修饰179

5.3.3.1 rRNA的修饰180

5.3.3.2 mRNA的修饰180

5.3.4 反转录181

5.3.5 转录与复制的异同182

6.1 原核基因表达调控的特点183

6真核基因表达调控183

6.2 真核基因的结构184

6.2.1 特点184

6.2.2 组蛋白185

6.2.3 非组蛋白185

5.2.3.1 NHP的修饰作用185

5.2.3.2 NHP的免疫原性185

6.2.3.3 NHP的特异性185

6.2.3.4 NHP对基因表达的调控186

6.2.3.5 NHp与DNA的结合186

6.2.3.6 NHP的亚细胞定位186

6.3.3 与诱导信号和中介基因有关187

6.4.1 顺式作用元件187

6.4 转录水平的调控187

6.3.2 非操纵子型187

6.3.1 DNA及DNA结合蛋白187

6.3 真核基因表达调控的特点187

6.4.1.1 启动子188

6.4.1.2 增强子188

6.4.1.3 其他元件188

6.4.2 反式作用因子189

6.4.2.1 DNA结合结构域189

6.4.2.2 转录活化结构域190

6.4.3 转录水平调控作用机制190

6.4.3.1 反式作用因子与DNA的相互作用191

6.4.3.2 反式作用因子对RNA聚合酶活性的影响191

6.4.3.3 反式作用因子之间的相互作用191

6.4.4 其他水平调控作用191

6.4.5.2 关于诱导性反式作用因子的研究192

6.4.5.1 关于癌基因与抗癌基因的研究192

6.4.5 DNA结合蛋白的研究进展192

7基因工程194

7.1 工具酶194

7.1.1 限制性核酸内切酶194

7.1.2 其他有关酶195

7.1.2.1 T4DNA连接酶195

7.1.2.2 Klenow片段195

7.1.2.3 牛小肠碱性磷酸酶195

7.2 载体195

7.2.1 质粒196

7.2.2 病毒DNA载体197

7.2.3 粘粒197

7.2.4 载体改建的进展198

7.2.5.4 加其他调控序列199

7.2.7 真核细胞克隆载体199

7.2.6 丝状噬菌体载体199

7.2.5.1 强启动子199

7.2.5.3 加筛选标记199

7.2.5.2 多克隆位点199

7.2.5 YAC199

7.3 基因工程技术路线200

7.3.1 体外连接201

7.3.1.1 粘性末端连接201

7.3.1.2 平末端连接201

7.3.1.3 定向连接201

7.3.1.4 加连接子201

7.3.1.5 加适配子201

7.3.2 转化202

7.3.3 筛选与鉴定202

7.3.4.1 外源基因在原核细胞中的表达203

7.3.4 重组子的扩增与表达203

7.3.4.2 外源基因在真核细胞中的表达205

8细胞周期207

8.1 细胞周期的概念207

8.1.1 概念207

8.1.2 细胞增殖周期的特点208

8.1.2.1 G1期209

8.1.2.2 S期209

8.1.2.3 G2期209

8.1.2.4 M期209

8.1.3 细胞周期时间209

8.2 细胞周期的研究方法212

8.2.1 标记有丝分裂百分数法212

8.2.1.1 研究方法212

8.2.1.2 研究方法的原理212

8.2.2.1 概念213

8.2.2 流式细胞术213

8.2.2.2 仪器的基本结构及工作原理214

8.2.2.3 流式细胞术的特点217

8.2.2.4 流式细胞术所测细胞生物学性质的多参量性217

8.2.2.5 流式细胞术常用探针217

8.2.3 细胞同步法219

8.2.3.1 自然同步219

8.2.3.2 人工同步法219

8.2.4 细胞融合法221

8.3 细胞周期的调控221

8.3.1 细胞周期蛋白和依赖细胞周期蛋白的蛋白激酶221

8.3.1.1 细胞周期蛋白221

8.3.1.2 P34cdc2/28蛋白激酶222

8.3.2.2 Rb223

8.3.2.1 DNA合成基因的表达调控223

8.3.2 细胞周期中的启动点223

8.3.3 S期DNA复制起始时的“开启”和“关闭”控制224

8.3.4 C2/M期cdc2活性调节224

8.3.4.1 MPF224

8.3.4.2 G2和M期中cdc2活性的调节225

8.3.5 P53蛋白与DNA损伤的检查225

8.3.6 细胞因子对细胞周期的作用225

8.3.6.1 生长因子225

8.3.6.2 抑制因子226

8.3.7 细胞周期自动调控机器226

8.3.7.1 调控中心226

8.3.7.2 检查机制227

8.4 细胞周期与肿瘤227

8.4.1 细胞周期与肿瘤增长227

8.4.2.2 DNA非整倍体的出现228

8.4.2 癌前病变的细胞动力学监测228

8.4.2.1 增生病变228

8.4.3 细胞周期与癌变的分子机理229

8.4.3.1 抑癌基因突变230

8.4.3.2 cyclin和CDK异常230

8.4.4 细胞周期与肿瘤诊断230

8.4.4.1 流式细胞术肿瘤诊断细胞学标准230

8.4.4.2 肿瘤恶性度的判定230

8.4.4.3 关于假阳性和假阴性231

8.4.5 肿瘤预后的预测231

8.4.6 细胞周期与肿瘤化疗231

8.4.6.1 细胞周期与抗癌药物的分类231

8.4.6.2 肿瘤细胞的同步化、周期化治疗232

9.2.1 胚胎细胞的分化潜能234

9.2 胚胎细胞的分化234

9.1 细胞分化的概念234

9细胞分化234

9.2.2 细胞核与细胞质的相互作用235

9.2.2.1 细胞核对细胞质的作用235

9.2.2.2 细胞质对核内基因活性的影响235

9.2.3 细胞间的相互作用235

9.2.3.1 胚胎诱导236

9.2.3.2 分化抑制236

9.2.3.3 细胞外物质对细胞分化的作用236

9.3 成体中的细胞分化239

9.3.1 干细胞的增殖与分化239

9.3.2 多能干细胞与定向干细胞239

9.4 细胞分化的分子机制241

9.5 细胞分化与肿瘤242

9.5.1 癌细胞是异常分化的细胞242

9.4.2 翻译水平的调控242

9.4.1 转录水平的调控242

9.5.2 癌基因与细胞分化243

9.5.3 肿瘤细胞的分化243

10细胞衰老与细胞死亡246

10.1 机体衰老与细胞衰亡246

10.1.1 人体组织细胞的动态分类246

10.1.1.1 更新组织246

10.1.1.2 稳定组织246

10.1.1.3 恒久组织247

10.1.1.4 可耗尽组织247

10.1.2 细胞分化与机体衰老247

10.1.2.1 体细胞支配理论247

10.1.2.2 调控系统主导衰老学说247

10.2 细胞衰老248

10.1.2.3 生殖与衰老相关学说248

10.2.1 细胞衰老的研究方法249

10.2.1.1 活体内细胞衰老研究249

10.2.1.2 体外细胞培养方法249

10.2.1.3 组织移植方法249

10.2.1.4 细胞组合实验249

10.2.1.5 分子生物学技术249

10.2.2 细胞衰老的表现250

10.2.2.1 细胞衰老的形态学改变250

10.2.2.2 细胞衰老的生化改变251

10.3 细胞衰老的分子机理251

10.3.1 差错论学派251

10.3.1.2 错误蛋白学说252

10.3.1.3 大分子交联学说252

10.3.1.1 代谢废物积累学说252

10.3.1.4 自由基学说253

10.3.1.5 体细胞突变学说255

10.3.1.6 DNA损伤修复学说255

10.3.2 遗传论学派256

10.3.2.1 密码限制学说256

10.3.2.2 细胞有限分裂学说257

10.3.2.3 重复基因失活学说257

10.3.2.4 衰老基因学说257

10.3.2.5 基因程控学说258

10.4 细胞死亡260

10.4.1 细胞死亡的方式260

10.4.1.1 细胞坏死260

10.4.1.2 细胞凋谢261

10.4.1.3 细胞程控性死亡261

10.4.2 细胞凋谢的生化改变261

10.4.3.1 bcl-2基因262

10.4.3 细胞凋谢的有关基因262

10.4.3.2 c-myc基因263

10.4.3.3 p53基因264

10.4.4 PCD的调控265

10.4.4.1 PCD诱导和抑制因素265

10.4.4.2 去存活因子PCD的机制265

10.4.4.3 影响PCD的其他细胞因子266

10.4.5 细胞凋谢与免疫266

10.4.5.1 细胞凋谢与淋巴细胞发育267

10.4.5.2 细胞凋谢与细胞免疫效应267

10.4.6 细胞凋谢与肿瘤267

10.4.6.1 肿瘤细胞凋谢及其调控267

10.4.6.2 细胞凋谢与肿瘤治疗新战略268

11癌基因269

11.1 癌基因研究的由来269

11.2.1 点突变272

11.2 癌基因激活机制与肿瘤发生272

11.2.2 基因扩增274

11.2.2.1 恶性肿瘤中癌基因的扩增274

11.2.2.2 癌基因扩增的染色体结构276

11.2.2.3 癌基因扩增的特点277

11.2.3 染色体易位278

11.2.4 促进子插入282

11.2.5 原癌基因甲基化水平降低282

11.2.5.1 癌基因的异常表达与低甲基化282

11.2.5.2 癌基因的转化能力与低甲基化283

11.2.5.3 染色体异常与低甲基化283

11.2.5.4 癌基因低甲基化参与肿瘤发生283

11.3 癌基因的分类284

11.3.1 酪氨酸激酶类284

11.4 原癌基因在染色体上的定位285

11.3.4 核内蛋白类285

11.5 癌基因克隆及序列分析285

11.3.3 生长因子类285

11.5.1 基因转移287

11.5.2.1 基因组文库的构建原理289

11.5.2.2 构建步骤289

11.5.2 癌基因分离289

11.5.2.3 基因组文库的完整性291

11.5.2.4 含有癌基因克隆的筛选292

11.5.3 癌基因分析296

11.6 癌基因的致癌途径296

11.7 原癌基因在正常细胞中的作用299

11.7.1 进化上高度保守300

11.7.2 调节细胞生长300

11.8 癌基因的表达与细胞周期302

11.8.1 “生长限制点”理论与“获能——前进”模型302

11.7.3 参与细胞的分化和发育302

11.8.2 恶性细胞中癌基因表达与细胞周期304

11.8.3 癌基因产物与细胞周期305

11.9 转基因动物在癌基因研究中的应用306

11.9.1 转基因动物产生的基本过程306

11.9.2 癌基因在转基因动物发育过程中的表达与肿瘤发生307

11.10 癌基因的研究动向308

11.10.1 改进基因转移的受体细胞和筛选方法309

11.10.2 克隆各种与癌变有关的基因309

11.10.3 癌基因和抗癌基因的联姻310

11.10.4.1 乳腺癌311

11.10.4.2 神经母细胞瘤311

11.10.4 探讨癌基因在临床诊断和预后方面的应用311

11.10.4.4 其他肿瘤312

11.10.5 细胞逆转研究与基因治疗312

11.10.4.3 肺癌312

12生长因子及其受体与癌314

12.1 生长因子314

12.1.1 表皮生长因子314

12.1.2 成纤维细胞生长因子315

12.1.3 血小板生长因子315

12.1.4 转化生长因子316

12.2 生长因子受体317

12.2.1 生长因子受体的分类317

12.2.2 生长因子受体结构域的功能317

12.2.3 生长因子在细胞核上受体的问题318

12.2.4 受体介导的细胞内信号系统318

12.3 生长因子与细胞周期的调控319

12.4 生长因子的多功能效应320

12.4.1 生长因子作用的细胞种类320

12.4.2 生长因子之间的相互作用321

12.4.3 受体之间的相互作用321

12.5.1.1 某些癌基因蛋白是某种生长因子类似物322

12.5.1 生长因子与癌基因的关系322

12.5.1.2 某些癌基因蛋白是某种生长因子受体的类似物322

12.5 生长因子与癌基因322

12.4.4 细胞的信号语言322

12.5.1.4 生长因子可刺激某些原癌基因的转录和表达323

12.5.2 生长因子、癌基因与细胞转化323

12.5.1.3 某些癌基因蛋白是长生因子信号通路中某一成份的类似物323

13.1.1.1 稳定染色体325

13.1.1 肿瘤抑制基因的作用325

13.1.1.2 参与细胞的分化与衰老325

13.1.1.3 细胞增殖的调节325

13.1 肿瘤抑制基因325

13肿瘤抑制基因和肿瘤的基因治疗325

13.1.2.1 Rb基因326

13.1.2.2 p53基因326

13.1.2 常见的肿瘤抑制基因326

13.1.2.3 WT1基因327

13.1.2.4 NF1基因327

13.1.2.6 DCC基因328

13.1.2.7 MTS1基因328

13.1.2.5 FAP基因328

13.2 肿瘤的基因治疗329

13.1.3 研究肿瘤抑制基因的意义329

13.2.1 定义329

13.1.2.9 BRCA基因329

13.1.2.8 WAF1基因329

13.2.2.2 反义寡核苷酸330

13.2.2.1 抑癌基因330

13.2.2.3 细胞因子基因330

13.2.2 目的基因的选择330

13.2.2.4 提高肿瘤细胞免疫原性的基因治疗331

13.2.2.5 肿瘤药物基因治疗332

13.2.3.3 体内直接注射法334

13.2.3.2 物理法334

13.2.3.4 定向导入法334

13.2.3.1 化学法334

13.2.3 基因导入方法334

13.2.4.3 长期表达效果难335

13.2.4.2 表达水平低335

13.2.4.4 整合随机性带来的危害性335

13.2.4.1 感染率低335

13.2.4 基因治疗的问题335

11.3.2 ras家族384