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第一节 免疫系统的主要功能1

(一)正常的免疫反应1

(二)异常的免疫反应1

第一章免疫学基础1

第二节 免疫系统的组成2

(一)中枢免疫器官2

(一)个体的组织屏障3

(二)非特异性细胞免疫3

第三节 非特异性免疫3

(二)外周免疫组织3

(三)非特异性体液免疫5

第四节 特异性免疫和抗原5

(一)特异性免疫5

(二)抗原6

第五节 免疫活性细胞7

(一)免疫活性细胞的来源和分化7

(二)T淋巴细胞和B淋巴细胞的亚群7

(三)T淋巴细胞和B淋巴细胞的表面标志8

(四)T淋巴细胞和B淋巴细胞的免疫功能9

(二)抗体10

(一)淋巴因子10

(五)T淋巴细胞和B淋巴细胞的区别10

(六)K细胞10

第六节 淋巴因子和抗体10

第七节 变态反应15

(一)变态反应的分型15

(二)第Ⅰ型变态反应(速发型变态反应)15

(三)第Ⅱ型变态反应(细胞毒型变态反应)16

(四)第Ⅲ型变态反应(免疫复合物型变态反应)16

(五)第Ⅳ型变态反应(迟发型变态反应)17

(一)抗原抗体反应的原理18

第二章免疫沉淀反应测定血浆和体液中蛋白质18

第一节 抗原与抗体的反应18

(二)抗原抗体反应的特性19

(三)抗原抗体结合的影响因素22

第二节 沉淀反应的特性和种类22

(一)絮状沉淀反应22

(二)环状沉淀反应——毛细管内沉淀试验22

(一)单向免疫扩散试验测定血清中IgG、IgA和IgM23

(三)凝胶中沉淀反应23

第三节 单向免疫扩散试验23

(二)单向免疫扩散试验测定血和尿中的转铁蛋白和IgM，从蛋白尿的选择性研究观察肾脏病变29

第四节 双向免疫扩散试验32

(一)双向免疫扩散试验测定血清中甲胎蛋白(α-FG)33

(二)双向免疫扩散试验测定血清中乙型肝炎e抗原、e抗体35

附：聚丙烯酰胺凝胶颗粒的制备38

(三)改良双向免疫扩散试验测定血清中细菌抗体39

(一)对流免疫电泳的基本概念40

第五节 对流免疫电泳试验40

(二)对流免疫电泳试验测定血清中甲胎蛋白42

(三)对流免疫电泳试验(不连续性)测定血清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)44

第六节 单向火箭免疫电泳44

附：标准曲线的绘制47

第七节 双向火箭免疫电泳48

第八节 免疫电泳试验49

(一)免疫电泳试验的步骤50

(二)微量免疫电泳试验50

附：标本的染色和保存52

(三)免疫电泳的分析52

流程图1.单向免疫扩散试验54

第三章异常免疫球蛋白的研究57

第一节 醋酸纤维薄膜电泳57

第二节 光密度计分析60

第三节 免疫球蛋白定量测定61

第四节 异常免疫球蛋白的免疫电泳61

(一)免疫电泳分析异常免疫球蛋白61

第五节 Sephadex G 200凝胶过滤63

(二)免疫电泳的注意点63

第六节 冷球蛋白的测定66

第七节 尿本周氏蛋白的分析68

(一)尿液的浓缩68

(二)醋酸纤维薄膜电泳分析尿本周氏蛋白68

(三)免疫电泳分析尿本周氏蛋白69

流程图2.醋酸纤维薄膜电泳70

第四章凝集和凝集抑制反应74

第一节 凝集反应的概述74

(一)凝集反应的特点74

(二)凝集反应的种类74

(四)凝集反应的应用76

(三)凝集反应常用的测定方法76

第二节 间接血凝试验77

(一)新鲜红细胞间接血凝试验测定青霉素抗体78

(二)醛化红细胞间接血凝试验测定血清中类风湿因子79

附：醛化红细胞的制备82

(三)醛化红细胞间接血凝试验测定抗DNA抗体84

第三节 反相间接血凝试验测定乙型肝炎表面抗原89

附：HBsAg抗血清的纯化92

第四节 胶乳凝集反应93

流程图3.新鲜红细胞间接血凝试验测定青霉素抗体95

流程图4.抗DNA抗体的测定97

流程图5.反向间接血凝试验测定乙型肝炎表面抗原102

流程图6.胶乳凝集反应测定血清中类风湿因子106

第五章补体和补体结合试验109

第一节 补体的生理109

(一)补体系统的组成及其基本生物学特点109

(二)补体系统的激活111

(三)补体激活反应的生理性控制机制116

(四)补体的生物学作用116

(二)补体损伤性作用在人类疾病中的表现117

(一)补体病理性损害作用的动物实验证据117

第二节 补体的病理反应117

第三节 50％溶血试验(简称CH50)测定血清中总补体活性118

(一)甲法118

(二)乙法121

附：123

(一)兔抗绵羊红细胞溶血素的制备123

(二)溶血素效价滴定124

第四节 补体C3组分的提取和测定125

(二)TEAE纤维素连续及分步洗脱法制备C3抗血清126

(一)C2抗血清的制备原理126

(三)酵母多糖-C3复合体法制备C3抗血清129

(四)单向琼脂扩散试验测定C3含量131

第五节 补体结合试验136

(一)补体结合试验的原理和方法136

(二)小量法补体结合试验137

(三)微量法补体结合试验143

流程图7.50％溶血试验测定血清中总补体活性149

流程图8.补体C3组分的提取和测定152

流程图9.补体结合试验(小量法)156

第一节 免疫荧光的原理和方法161

第六章免疫荧光技术161

第三节 抗体的纯化162

第二节 抗血清的制备162

第四节 荧光标记抗体的制备163

(一)荧光素的选择163

(二)透析法标记荧光抗体165

(三)搅拌法标记荧光抗体166

第五节 标记抗体的纯化和特性168

(一)标记抗体的纯化168

(四)去除游离色素168

(二)荧光抗体的特性170

附：F／P克分子比值的测定170

第六节 免疫荧光染色技术172

(一)材料的收集和保存172

(二)玻片和盖玻片的处理173

(三)标本的制备173

(四)标本的固定和保存174

(五)荧光抗体染色法175

(六)标本的非特异性荧光染色179

(一)荧光显微镜基本结构简介181

第七节 荧光显微镜术181

(二)标本观察183

第八节 免疫荧光技术的应用183

(一)直接荧光法对肾切片的观察183

(二)间接荧光法测定抗核抗体184

(三)间接荧光法测定抗平滑肌抗体188

(四)间接荧光法测定抗线粒体抗体189

(五)间接荧光法测定抗胃壁细胞抗体190

流程图10.免疫荧光技术192

(一)ELISA的原理201

(二)ELISA的种类201

第七章免疫酶技术201

第一节 酶联免疫吸附试验(简称ELISA)概述201

第二节 酶标记物的制备203

(一)抗体的选择203

(二)酶的选择203

(三)结合剂的选择和结合法204

(四)戊二醛标记“一步法”205

(五)戊二醛标记“二步法”206

(六)过碘酸盐氧化结合法206

(七)结合物的纯化和保存207

(一)固相载体的选择208

(二)酶结合物浓度的选择208

第三节 ELISA实验条件的选择208

(三)抗原的选择209

(四)标本的处理209

(五)底物的选择209

(六)终点测定210

第四节 ELISA的应用210

(一)ELISA测定抗原210

(三)ELISA间接法测定抗体(微量法)211

(二)ELISA测定抗体211

(四)ELISA间接法测定抗体(试管法)212

第五节 免疫过氧化物酶法214

(一)免疫过氧化物酶法的原理214

(二)免疫过氧化物酶法的分类214

第六节 免疫过氧化物酶法的应用215

(一)间接过氧化物酶结合法测定抗核抗体215

(二)抗过氧化物酶的抗体法测定肾组织的沉淀性抗体216

流程图11.戊二醛标记法219

流程图12.ELISA间接法测定抗体(微量法)224

第八章放射免疫技术227

第一节 放射免疫的原理227

(一)人血清免疫球蛋白E(IgE)的测定228

(一)放射免疫测定的抗原制备229

第二节 放射免疫测定技术229

(二)放射免疫测定的抗体制备230

(三)抗原或抗体的标记232

(四)分离B、F的方法236

(五)放射免疫分析法的评价237

第三节 放射免疫技术的应用238

(二)系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中抗双线DNA抗体的测定240

第九章循环中免疫复合物的测定243

第一节 循环中免疫复合物的概述243

(一)循环中免疫复合物的特性243

(二)测定循环中免疫复合物的方法分类244

第二节 免疫复合物试验的标准化245

第三节 应用C19测定血清中免疫复合物246

(一)C19的制备246

(二)C19沉淀试验247

(三)同位素碘标记C19的放射免疫试验248

第四节 抗补体试验测定血清中免疫复合物250

(一)试管法抗补体试验250

附：豚鼠补体的滴定252

(二)微量板法抗补体试验252

第五节 类风湿因子沉淀试验测定血清中免疫复合物255

(一)类风湿因子的制备255

(二)类风湿因子沉淀试验256

(一)血小板的制备257

第六节 血小板聚集试验测定血清中免疫复合物257

(二)血小板聚集试验258

第七节 Raji细胞的放射免疫试验测定血清中免疫复合物259

附：标准曲线的绘制260

流程图13.应用C19测定血清中免疫复合物263

流程图14.抗补体试验测定血清中免疫复合物(试管法)269

第十章组织相容性抗原(HLA)分型272

第一节 HLA的概述272

(一)HLA的性质及检出情况272

(二)HLA的分布273

(四)HLA的检测方法274

(三)HLA的结构274

第二节 HLA血清学测定——微量淋巴细胞毒试验277

(一)HLA-A、B、C抗原测定277

(二)HLA-DR抗原测定281

第三节 HLA细胞学测定——半微量混合淋巴细胞培养试验283

第四节 HLA分型的临床应用287

(一)选择器官移植的供受体287

(二)HLA分型与疾病的关联289

(四)HLA抗体与输血的关系291

(三)HLA分型在人类进化及法医中的意义291

流程图15.微量细胞毒试验(HLA)292

流程图16.半微量混合淋巴细胞培养试验294

第十一章淋巴细胞功能试验297

第一节 T淋巴细胞功能体内测定法——迟发型皮肤变态反应实验297

(一)传染性皮肤变态反应298

(二)二硝基氯苯(DNCB)皮肤试验299

(三)植物血凝素(PHA)皮肤试验301

第二节 T淋巴细胞E花环形成试验302

(一)全量法E花环形成试验303

(二)全量法活性花环形成试验306

(三)微量法E花环和活性花环形成试验308

第三节 淋巴细胞转化试验309

(一)外周血分离淋巴细胞培养法310

(二)微量全血培养法314

(三)2H-胸腺嘧啶核苷掺入试验314

附：PHA的提纯和效价测定317

附：pH标准管的配置317

第四节 移动抑制试验318

(一)毛细管法移动抑制试验319

(二)定量滴注法白细胞移动抑制试验323

第五节 B淋巴细胞花环形成试验326

(一)B淋巴细胞-鸡EAC花环形成试验326

(二)B淋巴细胞-鸡EA花环形成试验328

(三)E、EA、EAC的联合操作试验328

第六节 溶血空斑试验329

(一)琼脂溶血空斑试验330

附：Gey’s溶液配制332

(二)液相单层玻片溶血空斑试验332

流程图17.T淋巴细胞E花环形成试验334

流程图18.淋巴细胞转化试验341

流程图19.2H-胸腺嘧啶核苷掺入试验346

流程图20.巨噬细胞移动抑制试验348

流程图21.定量滴注法白细胞移动抑制试验353

流程图22.B淋巴细胞-鸡EAC花环形成试验355

流程图23.琼脂溶血空斑试验365

第十二章吞噬细胞的功能测定371

第一节 吞噬细胞的概述371

(一)吞噬细胞的种类和分布371

(二)吞噬和杀菌作用的过程371

第二节 巨噬细胞吞噬功能检查法372

(三)吞噬作用的后果372

第三节 硝基蓝四氮唑还原试验(简称NBT试验)374

(一)试管法NBT试验374

(二)毛细玻璃管法(微量法)NBT试验375

(三)内毒素激发NBT试验376

第四节 中性白细胞体外吞噬试验377

流程图24.巨噬细胞吞噬功能检查法380

流程图25.硝基蓝四氨唑还原试验(简称NBT试验)381

流程图26.中性白细胞体外吞噬试验385

第一节 光学测定法388

第十三章溶菌酶测定法388

第二节 琼脂平板打孔测定法389

流程图27.溶菌酶测定法391

第十四章临床免疫的标准化和质量控制395

第一节 临床免疫技术的标准化395

(一)生物物质标准品和参考制品的制备和特点395

(二)几种常用标准品的标准化397

第二节 临床免疫技术的质量控制400

(一)盐析法纯化蛋白质抗原404

第一节 蛋白质的纯化404

第十五章蛋白质纯化、鉴定、定量测定和抗血清的制备404

(二)盐析法纯化心肌的肌红蛋白406

第二节 凝胶过滤法406

(一)凝胶过滤法的基本原理407

(二)常用凝胶的种类和性质407

(三)凝胶过滤法的使用410

第三节 离子交换层析法413

(一)离子交换层析法的基本原理414

(二)常用离子交换剂的种类和性质415

(三)离子交换层析法的使用416

第四节 免疫吸附剂419

(二)免疫吸附剂的种类420

(一)免疫吸附剂的原理420

(三)载体与蛋白联结方式421

(四)免疫吸附剂的优缺点421

(五)应用活化的Sepharose 4B纯化抗IgG抗体422

(六)戊二醛交联法纯化α2M424

第五节 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定蛋白质抗原425

(一)聚丙烯酰胺凝胶电泳概述426

(二)盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳429

(二)紫外吸收法定量蛋白质434

第六节 蛋白质含量的测定434

(一)蛋白质含量测定的分类434

(三)双缩脲法定量蛋白质435

(四)福林-酚法定量蛋白质437

第七节 抗血清的制备437

(一)抗原的制备和动物的选择437

(二)抗原的注射途径和剂量437

(三)佐剂的作用原理和种类438

(四)免疫动物的方法438

(五)动物放血法440