《毛细管电泳》

第一章绪论1

1.1 电泳发展简史1

1.2 电泳分类3

1.3 毛细管电泳特点5

1.3.1 毛细管电泳与常规电泳比较5

1.3.2 毛细管电泳与高效液相色谱比较6

1.3.3 毛细管电泳特点7

参考文献8

第二章基础理论9

2.1 电泳9

2.2.1 电渗11

2.2 电渗及电渗控制11

2.2.2 电渗的控制14

2.3 毛细管电泳原理17

2.3.1 分离原理17

2.3.2 迁移时间和迁移率18

2.4 柱效和分辨率19

2.4.1 扩散与理论板数19

2.4.2 分辨率21

2.5 焦耳热和电场强度优化22

2.5.1 焦耳热和温度梯度22

2.5.2 温度梯度曲线引起的方差25

2.5.3 焦耳热和温度梯度的控制26

2.5.4 电场强度优化27

2.6.1 影响柱效的因素28

2.6 影响柱效的其它因素28

2.6.2 进样区带宽度29

2.6.3 溶质—毛细管壁相互作用30

2.6.4 电扩散作用32

参考文献34

第三章自由溶液毛细管电泳(FSCE)35

3.1 电泳迁移率35

3.1.1 迁移率与分子体积的关系35

3.1.2 缓冲溶液离子对溶质有效电荷和迁移率的影响36

3.1.3 迁移率的测定38

3.2.1 溶质的体积和电荷40

3.2 影响分离的主要因素40

3.2.2 缓冲溶液43

3.2.3 其它操作条件对分离的影响47

3.3 缓冲溶液添加剂49

3.3.1 添加剂的类型49

3.3.2 表面活性剂50

3.3.3 络合剂50

3.3.4 环糊精51

3.4 毛细管壁修饰54

3.4.1 键合相和涂覆相55

3.4.2 动态修饰58

3.5 应用60

参考文献63

4.1 阴离子分析65

4.1.1 原理65

第四章毛细管离子分析(ClA)65

4.1.2 电渗流改性剂68

4.1.3 背景电解质71

4.1.4 影响分离选择性的因素74

4.2 阳离子分析75

4.2.1 原理75

4.2.2 络合剂对分离的影响76

4.2.3 背景电解质77

4.3 应用79

参考文献80

5.1.1 胶束81

第五章毛细管胶束电动色谱(MECC)81

5.1 胶束及其增溶过程81

5.1.2 胶束增溶过程83

5.2 原理85

5.2.1 基本原理85

5.2.2 溶质的迁移速度表达式85

5.3 基本参数87

5.3.1 容量因子87

5.3.2 容量因子与分配系数K88

5.3.3 分辨率88

5.3.4 柱效89

5.4.1 表面活性剂种类93

5.4 影响分离的因素93

5.4.2 表面活性剂浓度94

5.4.3 缓冲溶液95

5.4.4 有机溶剂及其它添加剂95

5.4.5 其他操作条件96

5.5 其它电动色谱方法98

5.5.1 带电β-环糊精衍生物98

5.5.2 微乳液98

5.6 应用99

参考文献100

6.1 原理102

6.1.1 原理和迁移率表达式102

第六章毛细管凝胶电泳(CGE)102

6.1.2 聚合物的种类104

6.2 交联聚丙烯酰胺凝胶柱的制备104

6.2.1 结构和孔径104

6.2.2 凝胶柱的制备106

6.3 线性聚合物溶液(无胶筛分)107

6.3.1 基本原理107

6.3.2 重叠阀值108

6.3.3 网络大小109

6.4 影响分离的因素110

6.4.1 毛细管尺寸110

6.4.5 重现性111

6.4.4 进样111

6.4.2 凝胶浓度111

6.4.3 电场强度111

6.4.6 柱寿命113

6.5 应用115

6.5.1 肽和蛋白分子量测定115

6.5.2 低聚核苷酸及DNA分析117

6.5.3 其它117

参考文献118

第七章毛细管等电聚焦(CIEF)119

7.1 原理119

7.1.1 基本原理119

7.1.2 分辨率120

7.1.3 与区带电泳比较121

7.2 两性电解质及pH梯度形成121

7.2.1 两性电解质121

7.2.2 pH梯度形成122

7.3 实验中应注意的几个问题123

7.3.1 电渗流和吸附的消除123

7.3.2 阴极和阳极漂移123

7.3.3 聚焦区带的移动124

7.3.4 蛋白沉淀的抑制125

7.4 实验方法和应用125

7.4.1 实验方法125

7.4.2 应用126

参考文献127

第八章毛细管等速电泳(CITP)128

8.1 分离原理128

8.2 区带特征及定性定量方法130

8.2.1 区带特征130

8.2.2 定性定量方法132

8.3 方法比较和应用132

8.3.1 CITP与FSCE比较132

8.3.2 应用134

参考文献135

9.1.1 噪声和漂移136

9.1 检测器136

第九章毛细管电泳检测方法136

9.1.2 灵敏度137

9.1.3 检测限138

9.1.4 线性范围139

9.1.5 选择性139

9.1.6 时间常数140

9.2 紫外吸收检测140

9.2.1 原理140

9.2.2 检测器结构140

9.2.3 间接检测142

9.3 荧光检测142

9.3.2 检测器结构143

9.3.1 原理143

9.3.3 荧光衍生检测144

9.3.4 间接检测145

9.4 质谱检测145

9.4.1 CE—MS联用流程145

9.4.2 接口和离子化方法146

9.5 安培检测147

9.5.1 原理148

9.5.2 检测器结构148

9.5.3 检测模式149

9.6.1 电导检测150

9.6.2 激光光热检测150

9.6 其他类型检测150

9.5.4 间接检测150

9.6.3 激光喇曼检测151

9.6.4 化学发光检测151

9.6.5 放射性同位素检测151

9.6.6 折射指数检测152

参考文献152

第十章仪器和操作154

10.1 概述154

10.2 进样155

10.2.1 静压力进样156

10.2.2 电迁移进样156

10.2.3 在柱样品浓缩157

10.3.1 毛细管159

10.3 分离159

10.3.2 温度控制161

10.3.3 高压源161

10.4 检测161

10.5 数据记录和处理161

10.6 定性定量分析162

10.6.1 迁移时间和迁移率的重现性162

10.6.2 定量分析164

10.7 CE操作常见故障分析166

参考文献169

11.1 氨基酸170

第十一章毛细管电泳应用170

11.2 肽176

11.3 蛋白质186

11.4 核苷酸196

11.5 无机离子203

11.6 有机酸209

11.7 有机化合物219

11.8 药物235

11.9 手性化合物242

11.10 碳水化合物259

附录1 缩写说明264

附录2 符号说明266