《表2 全血中添加不同量抗体测定食蟹猴淋巴细胞亚群结果(s)》

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《基于流式细胞术的淋巴细胞亚群分类试验条件比较》

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注:与相同检测时长稀释比例为10:50的相应指标比较，**P<0.01，***P<0.001；与不同检测时间相同稀释比例指标比较，##P<0.01。

使用流式法作淋巴细胞亚群分类计数时，建议于50μl抗凝全血中添加10μl抗体。本研究分别比较在50μl抗凝全血中添加10、5、3和1μl抗体对CD4+及CD8+平均荧光强度的影响，从而判断抗体稀释浓度差异是否对检测的灵敏度产生影响。样本经1%的多聚甲醛固定后连续7 d使用流式细胞仪检测（表2），自制备第4天起，50μl抗凝全血中添加1μl的全血样本CD4+平均荧光强度与当天制备的添加10μl抗体的全血的样本相比存在显著性差异（P<0.01，P<0.001）。此外，所有样本至第4天起，CD4+及CD8+平均荧光强度出现显著衰减（P<0.01），抗体用量越少，衰减程度越高。上述结果提示为保证试验结果的可靠性，50μl全血中至少应添加3μl抗体用于流式检测，样本制备后应于3 d内完成检测。