《表2 筛选获得的11条SCoT引物序列》

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《基于SCoT分子标记的48份杨桃种质遗传多样性分析》

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参考Collard和Mackill（2009）的设计原则设计60条SCoT引物（SCoT1～SCoT60），由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。采用欧景莉等（2015）优化的SCoT-PCR反应体系，以马来西亚B17、廉江红阳杨桃、贵港酸杨桃种质1和夏威夷甜杨桃等8份遗传背景差异明显的杨桃种质嫩叶DNA为模版，从60条SCoT引物中筛选出11条扩增条带清晰稳定、多态性好的引物（表2），对48份供试杨桃种质进行PCR扩增。SCoT-PCR反应体系20.0μL:2.5 mmol/L Mg2+，0.3 mmol/L dNTPs，30 mg/L DNA模板，1.00μmol/L引物，0.4 U Taq DNA聚合酶。扩增程序:94℃预变性5 min；94℃1 min；50℃1 min；72℃90 s，进行35个循环；72℃延伸10 min。PCR产物用1.8%琼脂糖凝胶电泳进行检测，并在Bio-Rad UV-3型凝胶成像系统上观察并拍照。