《表3 PCR反应程序：2013～2018年广西部分规模猪场主要病毒性腹泻疫病流行病学调查研究》

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《2013～2018年广西部分规模猪场主要病毒性腹泻疫病流行病学调查研究》

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利用特异性引物对样品RNA进行RT-PCR扩增，反转录体系（20μL）:RNA模板7μL、5×Prime-ScriptTM缓冲液2μL、RT enzyme mix0.5μL、下游引物0.5μL。反转录反应条件:42℃40min，反应产物-20℃保存备用。PCR扩增体系:2×Taq PCR Master Mix12.5μL，ddH2O 8.5μL，上、下游引物各0.5μL，反转录产物（cDNA）3.0μL，总反应体系为25μL。PEDV、PoRV、TGEV和PDCoV的PCR扩增反应条件见表3。PCR反应结束后取10μL RT-PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像系统上观察结果，并拍照。