《表1 不同抗生素的稀释浓度设置》

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《副干酪乳杆菌的基因多样性及其抗生素耐受性分析》

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MIC值的测定在乳酸菌敏感性试验培养基（lactobacillus susceptibility MRS，LSM）中进行。参照ISO10932-2010（IDF223:2010）文件，LSM培养基由IST和MRS培养基按体积比9∶1混合制成。采用二倍数稀释法，选择相应的溶剂配置不同浓度抗生素稀释液（表1）；在无菌的96孔聚苯乙烯板中，每行第1孔加200μL培养基为空白对照，第2孔～第11孔加抗生素稀释液（浓度由低到高），第12孔不加LSM培养基（不含抗生素）作为生长对照，每孔100μL。将菌株培养至稳定期，测菌液吸光度OD625，根据OD625值预估菌液的稀释比例，使得稀释后的菌液浓度在105～106CFU/m L（OD625=1的参考浓度为3×108CFU/m L）。将稀释的菌悬液在第2孔～第12孔中加100μL，密封后置于厌氧工作站中37℃培养，48 h后取出用酶标仪测定OD625。比较不同浓度下的OD625，菌株不出现生长的抗生素浓度即为该抗生素对菌株的MIC值。同一抗生素浓度，做平行3个孔；做2次独立重复试验，最终确定抗生素对菌株的MIC值。