《表3 特异性检测杂交反应体系》

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《食源性致病菌生物芯片-RCA检测新方法》

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μL

为了验证芯片RCA的特异性，设计了特异性检测实验，点样制备了PC、NC、CP1、CP-H微阵列，按表3建立杂交反应体系进行杂交反应，含有不同组分靶标探针（0.2pmol/μL，NCCP、TP1、TP-H）的25μL杂交反应液分别与微阵列进行杂交，并进行在片连接，在片RCA扩增反应液中加入biotin-dUTP（终浓度0.02mmol/L），扫描检测结果，结果如图4所示，图4（a）的反应体系中只加入TP1，PC和CP1有荧光信号；图4（b）的反应体系中加入NCCP，NC和PC有荧光信号；图4（c）的反应体系中加入TP-H，PC和CP-H有荧光信号；图4（d）的反应体系中加入TP1和TP-H，PC、CP1和CP-H均有荧光信号.由图表明芯片RCA能够特异性地检测到其相应地靶标DNA分子，说明该检测方法具有较高的特异性.