《表1 引物信息:脑源性神经营养因子抑制牛卵泡颗粒细胞凋亡》
按RNA提取试剂盒(Takara,日本)说明书收集样品并提取总RNA,然后按照RNA反转录试剂盒(Takara,日本)说明书反转录合成20μL体系的cDNA,最后按照SYBR荧光定量染料(Takara,日本)的说明书操作,检测各组mRNA的相对表达量。根据说明书在冰上配制PCR反应液(20μL体系:SYBR染料,10μL;上下游引物,各0.5μL;cDNA,2μL;ddH2O,7μL)。采用两步法反应程序进行扩增,第1步95℃30 s预变性;第2步PCR反应,40个循环,每个循环95℃10 s,60℃30 s;最后获得溶解曲线。本试验有关的所有定量引物见表1,定量引物是由长春库美生物科技有限公司合成。结果采用2-ΔΔCT法计算目的基因相对于内参基因GAPDH的相对表达量。
图表编号 | XD0067127200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.06.01 |
作者 | 王阳辉、陈树雄、杨筱琼、李纯锦、陈璐、周虚 |
绘制单位 | 吉林大学动物科学学院、吉林大学动物科学学院、吉林大学动物科学学院、吉林大学动物科学学院、吉林大学动物科学学院、吉林大学动物科学学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |