《表1 紫芝倍半萜合酶GS02363的催化产物信息》

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《一个紫芝多产物倍半萜合酶的功能鉴定》

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含紫芝GS20363基因的工程菌经IPTG诱导24 h后，采用固相微萃取方法收集挥发性萜类物质。通过GC-MS分析检测到11种挥发性化合物。通过质谱分析发现其相对分子质量均为204 Da，与倍半萜的相对分子质量一致。将化合物质谱图与美国国家标准与技术研究院（NIST）的质谱文库比对后，结合文献报道初步鉴定了10个倍半萜化合物的结构。见表1，图4。保留时间18.6 min处的产物α-cadinol被认为是主要产物。保留时间16.56，16.68，18.44 min对应的代谢产物γ-cadinene，δ-cadinene和T-cadinol为次要产物。为了进一步确认化合物的结构，将已报道的担子菌倍半萜合酶基因COP3在大肠埃希菌BL21（DE3）中进行诱导表达，在相同的GC-MS分析条件下，检测到与文献报道一致的产物γ-muurlene，α-muurolene和δ-cadinene[7]。通过比较COP3和GS20363催化产物的GC-MS结果，确认GS20363也可以催化合成倍半萜化合物γ-muurlene，α-muurolene和δ-cadinene，这与质谱库检索的预测结果一致。