《表4 病毒浓度梯度：SMAD1基因的沉默和过表达及对秦川牛原代成肌细胞生肌的影响》

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《SMAD1基因的沉默和过表达及对秦川牛原代成肌细胞生肌的影响》

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PCR鉴定目的基因。收集P2代病毒，在沸水孵育10分钟后立即置于冰上。短暂离心后，取上清液作模板进行PCR反应。PCR鉴定条件与扩增目的基因相同。1.5.3病毒生物学滴度的测定在滴度测定前一天将HEK 293细胞接种到48孔板中。用DMEM完全培养基10倍梯度稀释病毒。具体做法如表4:在96孔板每孔中加入90μL培养基，向第一横排孔中加入待测病毒原液各10μL，混匀后取10μL混合液转至第二横排孔，如此稀释至第八横排孔。取稀释好的病毒混合液10μL加入相应的48孔板中。侵染48h后，通过荧光显微镜计数荧光细胞情况。在最高稀梯度m的孔数出N个带荧光的细胞，则病毒滴度为N×10m/mL（m为稀释梯度），若N>10，则需继续稀释。