《表3 各重组菌的生长情况及胞内NAD (H) 含量测定》

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《通过提高胞内辅酶水平促进L-苯甘氨酸的合成》

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各重组菌株经37℃活化后，于24℃下诱导培养12 h，首先通过紫外分光光度计测其细胞浓度（OD600），并计算细胞干重，之后收集菌体检测胞内NAD（H）质量摩尔浓度，结果见表3。基因pnc B和nad E在大肠杆菌中的过表达分别使提高胞内NAD（H）质量摩尔浓度提高了86.3%和59.3%，当两者共表达时则提高了2.92倍，双质粒重组菌E.coli BL21/pETDuet-ldh-fdh&pACYCDuet-pnc B-nad E胞内NAD（H）质量摩尔浓度较重组菌E.coli BL21/p ETDuet-ldh-fdh提高了2.35倍，但是NADH/NAD+的值在各重组菌中波动不大，说明pnc B和nad E的过量表达均可促进胞内NAD+的合成，使得胞内NAD（H）质量摩尔浓度显著提高，并不会造成胞内氧化还原态失衡，且两者对NAD+合成的促进作用具有累加效应。另外，pnc B和nad E过表达的重组菌生物量均不同程度地高于对照菌株，说明胞内NAD（H）质量摩尔浓度的提高对细胞生长具有一定的促进作用，可能是因为胞内NADH质量摩尔浓度的提高增加了细胞生长的能量供给。