《表2 乳铁蛋白梯度洗脱条件》

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《不同类型热处理方式对牛乳品质的影响》


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肝素亲和柱先加入5 mL结合缓冲溶液(84 mmol/L Na2HPO4,16 mmol/L NaH2PO4)平衡,处理完毕后加入样品提取液,待样液完全流出后,再用10 mL淋洗液(42 mmol/L NaH2PO4),8 mmol/L NaH2PO4) ,100mmol/L NaCl) 淋洗,弃去全部流出液。最后用2.5 mL洗脱液(42 mmol/L NaH2PO4),8 mmol/L NaH2PO4) ,1 mol/L NaCl) 洗脱,收集全部流出液,定容至3.5 m L。将收集溶液过滤膜,供液相色谱检测分析用。通过BEH300 C4色谱柱(Waters,100 mm×2.1 mm,1.7μm,300?)进行分离。梯度洗脱,流动相A为含有0.1%三氟乙酸的水溶液;流动相B为含有0.08%三氟乙酸的乙腈;梯度条件见表2所示,流速为0.3 mL/min,柱温为60℃,进样量为10μL;通过紫外检测器280 nm下进行检测。