《表5 S9代谢活化条件下微孔板与标准平皿回复突变菌落计数 (±s)》

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《微孔板与标准平皿Ames试验比较研究》

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微孔法Ames试验的主要用途在于致突变性初筛，减少所用菌株可进一步减少工作量和受试物用量。TA100是其中最敏感的菌株，其次为TA98和TA1535。研究提示，结合移码突变和点突变两种检测类型的菌株组合可有效检出大部分致突变剂，如TA98/TA100、TA100/TA1535和TA98/TA1535可分别检出93%、87%和83%的致突变剂[18]。因此部分微孔法Ames研究仅使用TA98和TA100两种菌开展。然而不同菌株的特性不同，如羟基蒽醌类化合物可能仅表现为TA1537为阳性[19]；而氧化型致突变剂、DNA交联剂等可能主要表现为含AT位点突变的TA102和WP2 vurA等菌株的结果为阳性[20]；尽管TA1535和TA100均为hisG46基因位点的碱基置换型突变，且理论上含有pKM101质粒的TA100应更加敏感，但已知的659种致突变剂中有5%的受试物可由TA1535检出，而TA100结果则为阴性[21]。因此，本研究中选用了7种可能在环境监测和安评领域中涉及的菌株进行全面比较。结果发现在微孔板条件下，尤其是使用24孔板时，阴性背景菌落数较少，如TA1535、TA1537和WP2 uvrA在有无代谢活化条件下的菌落计数均值在0～3。尤其是代谢活化条件下24孔板中TA1537的阴性背景值为0，重复试验结果一致，调整顶层培养基中的TA1537菌液含量为之前2倍时对突变率无影响。但当阳性剂2-AA浓度为0.3μg/孔时平均回复突变菌落数约为20个/孔。当孔径变小时，对阴性背景值较低的菌株突变率进行计数时应注意与受试物的抑菌性进行区分。