《Table 1.Characteristics of patients》

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《异基因造血干细胞移植术后微生物多样性的变化与肠道移植物抗宿主病的关系》

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称取200 mg粪便于2 ml EP管，具体操作步骤按照QIAamp DNA Stool Mini Kit（Qiagen，Germany）试剂盒的使用说明书进行。所有离心步骤应该在室温（15-25℃）、20 000×g（大约14 770 rpm）条件下进行:加入1.4 ml buffer ASL，涡旋1 min，在95℃下加热5 min；涡旋15 s并离心1 min，吸取1.2 ml上清液到新的2 ml EP管中，弃去沉淀；加入Inhibit EX Tablet（吸附药片），涡旋1 min以上至药片全部悬浮，室温下孵化1 min；离心3 min，吸取200μl上清液到含有15μl蛋白酶K的1.5 ml EP管中；加入200μl Buffer AL，涡旋15 s，在70℃孵育10 min；加入200μl无水乙醇，涡旋混匀，得到裂解产物；把全部裂解产物涂抹在QIAamp纯化柱上，离心1 min；把QIAamp纯化柱放入新的2 ml收集管中，加入500μl Buffer AW1，离心3 min；把QIAamp纯化柱放入新的2 ml收集管中，加入500μl Buffer AW2，离心3 min；将QIAamp纯化柱放入新的1.5 ml EP管中，加入200μl Buffer AE，室温孵化1 min，然后离心1 min以洗脱DNA。提取后的DNA用琼脂糖凝胶电泳检测DNA的完整性，并用Qubit Fluorometer检测DNA的浓度。