《表1 引物序列：LINC24065在体细胞核移植牛中的异常表达》

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《LINC24065在体细胞核移植牛中的异常表达》

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利用UCSC Genome Browser（http://genome.ucsc.edu/）数据库，在牛DLK1-DIO3印记域内的MEG8和MEG9基因间发现了2个可剪接的EST簇。选取第一个EST簇中的交叠序列，用Oligo7软件设计RACE引物RACE5′，RACE3′和RACE3′-1（表1），引物位于EST序列DY196469上，其中3′端引物为嵌套引物。以大脑做为RACE模板，LINC24065的5′-RACE和3′-RACE过程按照SMARTer RACE 5′/3′Kit（TaKaRa公司，大连，中国）的试剂盒说明进行操作。RACE产物用pEASY-Blunt Cloning Kit（Transgen，北京，中国）克隆并测序（华大基因公司）。本试验中所有用到的引物见表1。