《表1 PCR反应体系Tab.1 PCR reaction system》

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《蒽环类药物对BRCA1/2基因突变乳腺癌患者心功能的影响》

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采集所有受试者外周静脉血3 ml，枸缘酸钠抗凝，4℃下冰箱保存。1周内采用氯化钠盐析法与蛋白酶K消化-饱和法提取血液中基因组DNA，对BRCA1/2基因进行PCR扩增，引物序列根据要求设定。PCR反应体系见表1，反应条件:（1）94℃、5 min预变性；（2）进行35个周期循环（94℃、30 s，55℃、45 s，72℃、1 min，72℃、5 min）；（3）采用变性高效液相色谱法筛选分析突变BRCA1/2基因编码外显子与邻近的内含子剪切区域；（4）进行DNA测序证实（表1）。