《表1 荧光定量PCR反应体系Tab.1 Reaction system for q PCR》

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《低氧胁迫对鲢心肌细胞凋亡及其调控基因Bax、Bcl-2表达的影响》


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凋亡调控基因Bax、Bcl-2的表达变化采用荧光定量PCR检测。首先,用总RNA提取试剂盒(天根生化科技有限公司)提取冻存的心脏组织总RNA,然后按照Fast Quant RT Kit(with g DNase)(天根生化科技有限公司) 操作说明合成c DNA,并根据基因Bax、Bcl-2的序列用Primer Premier5.0设计引物荧光定量PCR所用引物,Bax-F1:5'-CTCTGCTCTTCAACCGACTC-3',Bax-R1:5'-CGGCACGCAAAGTAGAAA-3',退火温度55℃;Bcl-2-F1:5'-GCGCAACGCAGCTTCTTA-3',Bcl-2-R1:5'-GGCATCCCAACCTCCATT-3',退火温度59℃。荧光定量PCR采用三步法在BIO-RAD CFX ConnectTMOptics Module荧光定量PCR仪中进行,反应体系见表1。