《表2 弓形菌的分子生物学检测方法比较》

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《潜在食源性致病菌弓形菌在食品中的分布及检测研究进展》

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从目前的检测技术来看，单一检测技术往往在灵敏度或者准确性上有所局限，越来越多的研究者倾向于采用多种检测方法相结合来进行弓形菌的检测。Antolin等采用PCR结合酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）方法对禽肉中的弓形菌进行检测[82]。Vergis等采用16S rRNA基因PCR结合限制性内切酶（Eco RI、HindIII和Sal I等）酶切，可以分辨包括弓形菌在内的8种食源性病原菌（弓形菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌、弧菌、弯曲菌和耶尔森氏菌）[83]。Figueras等采用PCR结合RFLP方法（Mse I酶切），能够分辨弓形菌属内的6种弓形菌，其中包括嗜低温弓形菌的两个亚型[84]。弓形菌属细菌增加至17种后，Figureras等采用同样的方法，发现可以分辨出该属内的10种弓形菌，而另外7种采用Mse I酶切无法分辨的菌种可采用Mnl I和Bfa I酶切区分，该研究表明弓形菌属内的不同菌种在基因组水平上具有差异性[85]。Abdelbaqi等通过荧光定量PCR结合荧光共振能量转移的方法，在病人样本中检测到布氏弓形菌阳性[86]。通常情况下，从病例样本中采用传统的培养方法分离到布氏弓形菌和嗜低温弓形菌的概率为0.1%～3.0%[87]。分子生物学技术作为一种不依赖于培养的技术，摆脱了传统弓形菌检测鉴定过程中的培养条件、时间以及表型特征鉴定的限制，通常能够得到更为灵敏和准确的检测结果，同时也大大节约了检测时间（表2）。但是由于其仅针对细菌核酸进行检测，难以判断被检测细菌的生存状态，因此，能够快速准确判断细菌的数量及生存状态的检测方法还有待研究。