《表4 合蕊柱冰冻切片感官评价表》

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《蝴蝶兰花器官冰冻切片技术探讨》


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取蝴蝶兰盛花期的子房、花瓣、唇瓣和合蕊柱按照2.2处理,感官评价结果见表1—表4。子房冷冻切片最适蔗糖磷酸缓冲液质量分数为4%,最适切片厚度为15μm,此时冷冻切片易展片,完整度好,可清晰看到细胞的形态结构;过高的蔗糖磷酸缓冲液处理子房,切片易失水,皱缩,形态改变;10μm的子房冷冻切片厚度薄、容易碎,而且很容易卷缩,20μm的子房冷冻切片厚度虽然容易展片,但是切片厚度较厚而使切片模糊,不易得到好的切片。花瓣冷冻切片最适蔗糖磷酸缓冲液质量分数为8%,4%蔗糖磷酸缓冲液处理花瓣后的切片容易碎,切片不完整,16%的蔗糖磷酸缓冲液处理花瓣后的切片组织形态失水,变形。最适切片厚度为10μm,此时冷冻切片显微效果良好,可清晰看到花瓣的表皮细胞,10μm的花瓣冷冻切片厚度观察效果较好,而在15、20μm的切片厚度下均不能得到理想的效果。唇瓣冷冻切片最适蔗糖磷酸缓冲液质量分数为4%,较高的蔗糖磷酸缓冲液处理唇瓣后的切片薄壁细胞变形皱缩,观察效果不佳。最适切片厚度为20μm,此时观察得到的图片更加清晰,切片易展片,完整度高,在10、15μm的切片厚度下,唇瓣冷冻切片易切碎,不易展片,观察不到清晰完整的图片。合蕊柱冷冻切片最适蔗糖磷酸缓冲液质量分数为16%,较低的蔗糖磷酸缓冲液处理唇瓣后的切片易碎,不完整。最适切片厚度为10μm,此时易获得完整切片,2个花粉团清晰可见,而在15、20μm的切片厚度下则出现不清晰、模糊、重叠等现象。蝴蝶兰花不同器官最适条件冷冻切片效果图见图1—图4。