《表1 PCR测序引物:难治性慢性丙型肝炎患者中医证型与IL-28B SNP的相关性研究》

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《难治性慢性丙型肝炎患者中医证型与IL-28B SNP的相关性研究》


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取患者外周静脉血,EDTA抗凝,取500μL,采用基因组DNA提取试剂盒(北京天根公司)依照说明书的步骤提取人类基因组DNA。再采用超微量核酸分析仪(Eppendorf公司,德国)测定DNA含量。根据HCV基因组5’-UTR、C/E1,运用PCR的方法对人类IL-28B基因SNP位点rs12980275(A/G)、rs12979860(C/T)、rs8099917(T/G),rs10853728(C/G)扩增后用3730测序仪测序并分型(上海生工生物工程有限公司)。PCR反应条件:95℃预变性3 min;94℃变性30 s,55℃复性35 s,72℃延伸40 s,共35个循环;最后72℃延伸10 min。4个位点的引物设计由PubMed Primer blast设计,由上海生工生物工程有限公司合成,引物序列见表1。