《表1 PCR引物序列：A型流感病毒对小鼠肺部菌群及趋化因子CCL5和CXCL10的影响及麻杏石甘汤干预作用研究》

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《A型流感病毒对小鼠肺部菌群及趋化因子CCL5和CXCL10的影响及麻杏石甘汤干预作用研究》

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取出液氮中保存的肺组织，按照总RNA提取试剂盒说明书提取各组样品的总RNA。利用多功能酶标仪检测样品在波长260 nm与280 nm处的吸光度值A260与A280。选择A260/A280值在1.8～2.0的样品，用RNase Freed H2O将样品质量浓度调整至500～600 ng/μL，逆转录成c DNA，以c DNA做模板，按Ultra SYBR Mixture试剂说明，分别加入GAPDH、CCL5、CXCL10引物进行扩增，见表1。PCR反应为50μL体系，反应体系含c DNA2μL，Ultra SYBR Mixture（Low ROX）25μL，10μmol/L上下游引物各1μL，以dd H2O补足至50μL。反应条件：95℃10 min，95℃10 s，60℃1 min，40个循环，60～95℃绘制熔解曲线。采用2-ΔΔCt法计算目的基因相对表达量。