《表1 中国荷斯坦牛TLR1～TLR6基因的SNPs位点突变类型及等位基因频率估算》

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《DNA池快速筛查中国荷斯坦牛TLR_1～TLR_6基因SNPs及等位基因频率估算》

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由DNA池P1～P15引物扩增产物的琼脂糖凝胶电泳获得条带清晰且无杂带的单一条带，与预期目的片段长度相符。扩增产物测序结果与普通牛TLR1、TLR2、TLR6基因进行Blast比对共筛查出22个SNPs，TLR1基因编码区发现9个SNPs，分别将其命名为A61T-TLR1、C632A-TLR1、C1408T-TLR1、C1451T-TLR1、A1461G-TLR1、A1475C-TLR1、G1550A-TLR1、G1596A-TLR1（图1），导致5个氨基酸发生改变（表1）。其中A61T-TLR1错义突变使氨基酸由原来的赖氨酸（Lys）替换为甲硫氨酸（Met）；C632A-TLR1突变使苯丙氨酸（Phe）替换为亮氨酸（Leu）；C1408T-TLR1突变使丙氨酸（Ala）替换为缬氨酸（Val）；A1461G-TLR1突变使异亮氨酸（Ile）替换为缬氨酸（Val）；G1596A-TLR1突变使缬氨酸（Val）替换为异亮氨酸（Ile）。