《表1 LC-MS/MS定量分析单克隆抗体的特征肽》

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《治疗性单克隆抗体的药物监测:LC-MS/MS技术的应用进展》


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目前,特征肽的确定方法主要包括:(1)从已有实验数据中寻找特征肽;(2)根据相关数据库预测特征肽,并选取可信度高的肽段进行进一步比对,常用工具软件包括Peptide Mass,Protein BLAST,Peptide Atlas,Skyline,Uni Prot/Swissprot等[14,18]。该法应用较多,如Peng等[19]先通过Peptide Mass软件预测了英夫利昔单抗CDR区的肽段,然后用BLAST软件对比了人血清蛋白和英夫利昔单抗的氨基酸序列,并排除了血清中存在的肽段。通过理论分析对比,从而选出候选肽段。为避免后续方法开发出现其他问题,因此建议选择两个或多个特征肽进行MS/MS定量[14]。特别是采用选择性反应监测模式(SRM)进行测定时,质量分辨率不够高,可能会存在离子通道的干扰,样品分析中若出现较明显的信号变化,提示可能存在干扰[20]。部分文献中抗体药物进行LC-MS/MS分析时选用的特征肽见表1。