《表3 SSR-PCR各反应体系组分用量》

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《金铁锁SSR-PCR反应体系的建立与优化》

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μL

以提取得到的金铁锁DNA为模板，针对影响金铁锁SSR-PCR体系建立的4个因素：模板DNA、引物、Taq DNA聚合酶、dNTP 4个用量进行L16（44）正交实验[26]。每因素设4个水平（表2），2个重复，共32个处理，按表3添加不同体积试剂于PCR管中并进行标记，除此之外每管还应加入2μL Taq Buffer缓冲液，用ddH2O补足反应体系总体积到20μL。PCR扩增反应程序为：94℃预变性3 min；94℃变性30 s，60℃退火45 s，72℃延伸1 min，37个循环；然后72℃最终延伸10 min，于4℃保存。