《表1 变量存储区分配:纳米二氧化钛(nTiO_2)对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)光合系统的影响》

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《纳米二氧化钛(nTiO_2)对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)光合系统的影响》


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培养48 h和120 h后,分别从对照组和10mg·L-1 nTiO2暴露组中各取藻液40 mL,12 000 rpm离心10 min获得藻细胞。然后提取RNA,具体方法依据说明书(E.Z.N.A.Total RNA Kit II,Omega)进行。提取RNA后进行反转录获得与三角褐指藻RNA碱基序列互补的c DNA。使用实时荧光定量PCR仪(ABI PRISM 7000,美国)进行检测。相关试剂采用SYBR Prime RT-PCR Kit(Ta KaRa)。反应条件如下:预变性95℃,30 s,变性95℃5 s,退火和延伸64℃30 s,共计循环40次。实时荧光定量所用PCR引物序列如表1所示。以同一时间点无n TiO2组中的一个样品作为对照(即该样品中目的基因的表达量设定为1),使用2-△△Ct方法计算每个基因的相对表达水平(Livak et al.,2001;Schmittgen et al.,2008)。