《表2 SSCP电泳条件：FGF21基因多态性与不同性别绵羊生长性状和胴体性状的关联分析》

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《FGF21基因多态性与不同性别绵羊生长性状和胴体性状的关联分析》

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PCR反应体系（25μL）为：含基因组DNA的FTA卡圆片（1.2 mm） 1个，5×Q Buffer缓冲液2μL，10×PCR Buffer缓冲液2μL，d NTPs（50μmol/L)1.2μL，Mg Cl2溶液（3μmol/L）1.2μL，上下游混合引物(0.25μmol/L） 1μL，Taq聚合酶（5U/μL） 0.1μL，dd H2O补至25μL。PCR扩增程序：95℃预变性3 min；95℃变性30 s，62℃退火30 s （P1和P2引物退火温度相同），72℃延伸30 s，循环34次；72℃延伸5 min，10℃保存。取PCR产物2μL，加入到含8μL变性上样缓冲液（98%去离子甲酰胺，0.025%二甲苯氰，0.025%溴酚蓝，10 mmol/L乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）)的灭菌PCR管中，金属浴105℃热变性5 min后立即于冰水混合物中冷却5 min，然后点样于不同浓度的非变性聚丙烯酰胺凝胶中（Acr∶Bis=37.5∶1），置于0.5×TBE缓冲液的垂直电泳槽中电泳。19 h后银染显色，判断SSCP带型。P1和P2扩增产物最佳SSCP检测条件见表2。